Anticorps monoclonal de lapin anti-NEDD8 pour WB, ELISA - Q15843

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NEDD8

• La NEDD8 est une protéine de type ubiquitine qui se conjugue aux cullines et à p53/TP53, et est essentielle au contrôle du cycle cellulaire et à l'embryogenèse. Son liaison aux cullines permet le recrutement d'E2 au niveau du complexe ligase E3 cullin-RING, facilitant la polyubiquitination et la dégradation protéasomale des cyclines et des protéines régulatrices. Références associées : PMID:10318914 PMID:10597293 PMID:11953428
• La conjugaison de la NEDD8 à p53/TP53 inhibe son activité transcriptionnelle. Références associées : PMID:15242646
• L'activation de la NEDD8 requiert le complexe E1 UBE1C-APPBP1 et l'enzyme E2 UBE2M. Références associées : PMID:14690597
• La NEDD8 réalise également la neddylation de l'EGFR, stabilisant la protéine et favorisant sa translocation vers la membrane cellulaire. Références associées : PMID:28891468
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire.
• Elle est fortement exprimée dans le cœur, le muscle squelettique, la rate, le thymus, la prostate, les testicules, les ovaires, le côlon et les leucocytes du sang périphérique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la formation de liaisons isopeptidiques, avec un poids moléculaire d'environ 9 kDa (UniProt : 9072 Da).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les 81 acides aminés N-terminaux de la NEDD8 humaine (NP_006147.1), une séquence très conservée chez l'homme, la souris et le rat, garantissant une large réactivité croisée.
• Pour l'analyse par Western blot, notez la masse d'environ 9 kDa : utilisez un gel à haut pourcentage (15%) et optimisez les conditions de transfert des protéines pour éviter la migration excessive, et validez les performances dans les lysats de cellules ou de tissus concernés.
• Pour l'ELISA, associez-le à un anticorps de détection adapté ou utilisez-le comme réactif de détection ; une optimisation empirique des conditions de revêtement et de détection est recommandée.
• Bien qu'il soit validé pour l'homme, la souris et le rat, la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être vérifiée par alignement de séquence de la région de l'immunogène.

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