Anticorps polyclonal anti-NEDD4 pour WB, IHC-P, ELISA - P46934

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NEDD4

• NEDD4 (neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4) est également connu sous les noms RPF1, NEDD4-1 et protéine 53 inductrice de la prolifération cellulaire. Il s'agit d'une ubiquitine ligase E3 de type HECT qui joue un rôle essentiel dans la dégradation des protéines, la signalisation des récepteurs et l'autophagie.
• En tant qu'ubiquitine ligase E3, NEDD4 accepte l'ubiquitine des enzymes E2 et la transfère spécifiquement sur la lysine-63 des substrats cibles, formant ainsi des chaînes de polyubiquitine. Références associées : PMID:19920177, PMID:21399620, PMID:23644597
• NEDD4 ubiquitine un large éventail de substrats, notamment les récepteurs des facteurs de croissance (IGF1R, FGFR1, EGFR), les protéines de signalisation (RAPGEF2, TNK2, BRAT1, DAZAP2) et la machinerie transcriptionnelle (POLR2A), ciblant nombre d'entre eux pour une internalisation et une dégradation lysosomale ou protéasomale. Références associées : PMID:21765395, PMID:11598133, PMID:20086093, PMID:25631046, PMID:11342538, PMID:19920177
• Le rôle de NEDD4 dans la régulation de la stabilité de PTEN par polyubiquitination fait débat ; certaines études suggèrent un lien direct, tandis que d'autres le remettent en question. Références associées : PMID:18562292, PMID:17218260
• NEDD4 agit comme une plateforme de recrutement pour USP13, formant un complexe de déubiquitination qui clive les chaînes d'ubiquitine liées à Lys-48 de VPS34, stabilisant ainsi VPS34 et favorisant la formation des autophagosomes. Références associées : PMID:32101753
• Lors d'une infection virale, NEDD4 ubiquitine la protéine VP40 du virus Ebola, contribuant ainsi au bourgeonnement viral.
• NEDD4 se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire, et subit des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 160-460, une région centrale de NEDD4 humain, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes ou domaines fonctionnels ; une validation dans le système d'échantillons prévu est recommandée.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 149 kDa ; il est conseillé d'utiliser un gel à faible pourcentage (par exemple 6-8 %) et de prolonger les temps de transfert afin d'assurer un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• En immunohistochimie (tissus inclus en paraffine), les conditions de récupération antigénique peuvent nécessiter une optimisation ; inclure des témoins positifs et négatifs appropriés afin de confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, la nature polyclonale peut conférer une avidité élevée ; évaluer les performances de l'anticorps à la fois comme anticorps de capture et de détection, et le valider par rapport à des standards recombinants pertinents.

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