Anticorps monoclonal anti-NEDD4 pour WB, ELISA - P46934

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NEDD4

• NEDD4 (Neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4) est une ligase E3 ubiquitine-protéine de type HECT qui transfère l'ubiquitine vers les protéines cibles, catalysant principalement la polyubiquitination liée à Lys-63. Références associées : PMID:19920177 PMID:21399620 PMID:23644597
• Il régule les récepteurs tyrosine kinases en monoubiquitinant IGF1R et FGFR1, ce qui entraîne leur internalisation et leur dégradation lysosomale. Références associées : PMID:21765395
• NEDD4 ubiquitine des molécules de signalisation clés, notamment VEGFR-2/KDFR, RAPGEF2, le domaine intracellulaire de ERBB4, TNK2 et POLR2A, influençant des processus tels que le développement des dendrites neuronales, la signalisation EGFR et la régulation transcriptionnelle. Références associées : PMID:11598133 PMID:20086093 PMID:19920177
• Il forme un complexe de déubiquitination avec USP13 pour cliver les chaînes d'ubiquitine liées à Lys-48 de VPS34, stabilisant VPS34 et favorisant la formation d'autophagosomes. Références associées : PMID:32101753
• Au niveau subcellulaire, NEDD4 est localisée dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec ses rôles dans l'endocytose, la signalisation nucléaire et le renouvellement des protéines associées à la membrane.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité et ses interactions.
• Pendant l'infection virale, NEDD4 ubiquitine la protéine VP40 du virus Ebola, facilitant le bourgeonnement viral.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1200–1300 de la région C-terminale de la NEDD4 humaine. Confirmez la réactivité de l'anticorps avec les isoformes spécifiques si plusieurs variants sont présents dans l'échantillon cible.
• Pour le Western blotting, la NEDD4 a un poids moléculaire prédit d'environ 149 kDa. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, 6–8 % de SDS-PAGE) et des temps de transfert prolongés pour garantir une efficacité optimale pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon à l'aide de contrôles positifs (par exemple, lysats de HEK293 ou HeLa) pour garantir la spécificité et la sensibilité pour l'application prévue.
• Pour l'ELISA, envisagez d'optimiser les conditions de revêtement et de détection pour obtenir un rapport signal/bruit maximal.

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