Anticorps polyclonal anti-NDUFS3 pour WB et ELISA - O75489

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NDUFS3

• NDUFS3 est une protéine fer-soufre de 30 kDa qui agit comme sous-unité centrale du Complexe I mitochondrial (NADH : ubiquinone oxydoréductase).
• Elle est essentielle à l'activité catalytique du Complexe I, facilitant le transfert d'électrons du NADH vers l'ubiquinone et contribuant à la translocation de protons à travers la membrane interne. Références associées : PMID:14729820, PMID:30140060
• NDUFS3 joue un rôle crucial dans l'assemblage et la stabilisation de l'holoenzyme du Complexe I ; des mutations de ce gène causent un déficit du Complexe I mitochondrial (MC1DN8). Références associées : PMID:24028823
• La protéine est synthétisée sous forme de précurseur avec une séquence de ciblage mitochondrial N-terminale, qui est clivée lors de l'import dans la mitochondrie.
• Elle se localise dans la membrane interne mitochondriale, où elle s'intègre dans le bras membranaire du Complexe I.
• L'épissage alternatif du gène NDUFS3 produit plusieurs variants de transcrits, qui peuvent potentiellement réguler l'expression ou la fonction de la protéine.
• En tant que composant de la chaîne respiratoire, NDUFS3 est exprimé de manière ubiquitaire mais est particulièrement abondant dans les tissus à forte demande énergétique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une région commune à la NDUFS3 humaine (aa 37-264), qui est très conservée chez la souris, ce qui confirme les indications de réactivité croisée indiquées sur la fiche technique. Les chercheurs doivent valider la réactivité spécifique à l'espèce dans leur propre système expérimental.
• Pour le Western blot, utilisez des lysats enrichis en mitochondries ou des lysats de cellules entières issus de tissus à forte teneur mitochondriale (par exemple, cœur, foie) pour améliorer la détection de la bande d'environ 30 kDa.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser le même fragment de protéine recombinante comme antigène de revêtement pour la détection quantitative des anticorps spécifiques de NDUFS3.
• Incluez des contrôles appropriés : un contrôle positif tel qu'un lysat de tissu humain ou de souris connu pour exprimer NDUFS3, et un contrôle négatif (par exemple, échantillon avec knock-out ou déplétion de NDUFS3) pour confirmer la spécificité.
• Optimisez empiriquement la dilution de l'anticorps et les conditions d'incubation pour chaque application, car les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre.

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