Anticorps polyclonal de lapin anti-NDST1 pour WB, ELISA - P52848

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NDST1

• La NDST1 est l'enzyme bifonctionnelle essentielle qui initie la modification de l'héparane sulfate en catalysant séquentiellement la N-désacétylation et la N-sulfatation des résidus glucosamine, produisant l'héparosane N-sulfaté nécessaire à la biosynthèse ultérieure de l'héparine et de l'héparane sulfate. Références associées : PMID:35137078, PMID:9230113, PMID:9744796
• Cette étape enzymatique est limitante et dicte le motif de sulfatation final de l'héparane sulfate, qui détermine à son tour sa capacité à interagir avec des protéines comme la L-sélectine, participant ainsi à l'adhésion et au trafic des cellules inflammatoires.
• L'activité de la NDST1 est nécessaire pour la sécrétion exosomale de la syndécane, de la SDCBP (synténine) et de la CD63, mettant en lumière une fonction non canonique dans la biogenèse ou la libération des vésicules extracellulaires. Références associées : PMID:22660413
• Un isoforme issu d'un épissage alternatif (isoforme 2) est dépourvu des deux activités catalytiques et fonctionne comme un régulateur dominant-négatif, potentiellement en modifiant la stoechiométrie des complexes enzymatiques biosynthétiques.
• Au niveau subcellulaire, la NDST1 est une protéine membranaire intégrale de l'appareil de Golgi, avec une double localisation dans les membranes du Golgi cis et du réseau trans-Golgi.
• La protéine est largement exprimée dans les tissus, mais elle est particulièrement abondante dans le cœur, le foie et le pancréas, ce qui correspond aux systèmes d'organes nécessitant une biosynthèse importante d'héparane sulfate.
• La NDST1 est sujette à la glycosylation et à la formation de ponts disulfure ; des mutations du gène NDST1 sont associées à une déficience intellectuelle, soulignant son rôle critique dans le développement.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 40–170) englobe la région N-terminale partagée par l'isoforme 1 et l'isoforme dominant-négatif 2 ; ainsi, l'anticorps peut reconnaître les deux variants d'épissage et doit être validé dans le système d'échantillons pertinent.
• En Western blot, la protéine NDST1 mature migre à un poids moléculaire apparent d'environ 101 kDa ; des décalages de bande ou des bandes multiples peuvent provenir de la glycosylation ou de complexes liés par des ponts disulfure, il est donc conseillé d'utiliser des conditions réductrices et des contrôles positifs appropriés.
• Pour l'ELISA, cet anticorps polyclonal peut servir de réactif de capture ou de détection ; les utilisateurs finaux doivent effectuer des titrages en damier avec leur antigène cible spécifique (protéine recombinante ou lysat cellulaire) pour optimiser les performances.
• Une réactivité croisée avec la NDST1 murine étant rapportée, l'anticorps est adapté aux études sur la souris ; néanmoins, confirmez la conservation de l'épitope par alignement de séquences et par des expériences pilotes sur des échantillons murins.

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