Anticorps polyclonal de lapin anti-NCKAP1 pour WB et ELISA - Q9Y2A7

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de NCKAP1

• La protéine 1 associée à NCK (NCKAP1), également désignée HEM2, NAP1, NAP125 ou p125Nap1, est une protéine de 128,8 kDa codée par le gène NCKAP1 chez l’humain.
• NCKAP1 est un composant essentiel du complexe régulateur WAVE, qui favorise la formation des lamellipodes en régulant la réorganisation des filaments d’actine par l’intermédiaire du complexe Arp2/3, un processus activé par la petite GTPase RAC1.
• Au sein du complexe WAVE1, NCKAP1 est nécessaire au trafic endocytaire et à la signalisation induits par le facteur neurotrophique dérivé du cerveau (BDNF) depuis les endosomes précoces via le récepteur NTRK2.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire et est enrichie au niveau de la membrane des lamellipodes, ce qui concorde avec son rôle dans la motilité cellulaire.
• NCKAP1 est largement exprimée dans les tissus humains, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur et les muscles squelettiques ; elle est notamment absente des leucocytes du sang périphérique. Dans le cerveau, NCKAP1 est présente dans les cellules de Purkinje, le noyau denté du cervelet, la région CA4 de l’hippocampe et le gyrus denté, ainsi que dans la substance grise et la substance blanche frontales. Références associées : PMID:28940097
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, et l’épissage alternatif génère plusieurs isoformes. Les mots-clés UniProt mettent également en évidence une hélice transmembranaire et de potentielles interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre la région N-terminale (aa 1 à 250) de NCKAP1 humain ; la réactivité croisée avec la souris et le rat suggère une conservation de l’épitope, mais une validation dans chaque espèce est recommandée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 129 kDa ; il est conseillé d’utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage et de prolonger les temps de transfert afin d’assurer le transfert efficace de cette protéine de haut poids moléculaire.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un titrage de l’anticorps et une optimisation des concentrations d’antigène de revêtement ; les performances doivent être confirmées à l’aide de la protéine NCKAP1 recombinante ou de lysats cellulaires.
• En tant qu’anticorps polyclonal, la constance entre les lots peut varier ; l’utilisation de contrôles positifs et négatifs appropriés est recommandée pour obtenir des résultats reproductibles.

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