Anticorps Monoclonal Anti-NCK1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16333

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NCK1

• NCK1 est une protéine adaptatrice SH2/SH3, également connue sous le nom de NCK, nck-1 ou NCKalpha, codée par le gène NCK1 ; l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• Elle s'associe aux récepteurs de facteurs de croissance phosphorylés sur la tyrosine (par exemple, KDR, PDGFRB) et à leurs substrats, reliant l'activation du récepteur aux cascades de signalisation en aval.
• NCK1 maintient de faibles niveaux de phosphorylation d'EIF2S1 en favorisant sa déphosphorylation par la protéine phosphatase 1 (PP1), régulant ainsi l'initiation de la traduction.
• Elle participe à la réponse aux dommages à l'ADN, facilitant une activation efficace des effecteurs en aval comme CHEK2, en aval des capteurs de dommages ATM/ATR.
• La protéine module l'activation d'EIF2AK2/PKR par l'ARN double brin, influençant la réponse au stress intégrée.
• NCK1 interagit avec les récepteurs de l'éphrine, contribuant potentiellement aux processus d'adhésion et de migration cellulaires.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le réticulum endoplasmique et le noyau, cohérente avec ses rôles dans la transduction du signal et l'expression des gènes.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler ses interactions et ses fonctions ; la protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 43kDa.

Guidance Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu des acides aminés 200-300 du NCK1 humain ; envisagez d'utiliser un témoin positif exprimant la protéine NCK1 pleine longueur pour la validation.
• Pour le Western blot, détectez une bande à environ 43kDa dans des lysats de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat ; validez la spécificité par blocage peptidique ou par des contrôles de knockdown/knockout.
• En immunohistochimie (sections incluses en paraffine), une récupération de l'antigène peut être nécessaire ; optimisez les conditions de coloration pour chaque type de tissu.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour préserver l'accessibilité de l'épitope et l'architecture cellulaire.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier d'un couplage avec un anticorps de détection approprié ; envisagez des titrations en damier pour un rapport signal/bruit optimal.

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