Anticorps polyclonal anti-NCF4/p40-phox pour WB, ELISA - Q15080

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NCF4/p40-phox

• NCF4 (Neutrophil cytosol factor 4), également appelé p40-phox, SH3PXD4 ou NCF, est une protéine de 39032 Da codée par le gène NCF4 situé sur le chromosome 22 humain. Il est majoritairement exprimé dans les cellules hématopoïétiques.
• p40-phox est une sous-unité régulatrice du complexe NADPH oxydase des phagocytes, qui génère de l'anion superoxyde (O2(-)) en transférant les électrons du NADPH cytosolique vers l'oxygène moléculaire, une étape essentielle pour l'élimination des microbes par les phagocytes.
• L'activation de la NADPH oxydase implique l'assemblage des sous-unités cytosoliques (dont p40-phox, p47-phox, p67-phox) avec la flavocytochrome b558 liée à la membrane (gp91-phox et p22-phox) après stimulation cellulaire.
• p40-phox possède un domaine PX N-terminal qui se lie au phosphatidylinositol 3-phosphate, et un domaine SH3 C-terminal, médiant les interactions protéine-lipide et protéine-protéine essentielles à l'activation de l'oxydase et au ciblage membranaire.
• Au niveau sous-cellulaire, p40-phox se trouve dans le cytosol des cellules au repos et se transloque vers les membranes des endosomes et des phagosomes lors de l'activation, facilitant la production localisée de ROS (espèces réactives de l'oxygène).
• L'épissage alternatif génère des isoformes, et des mutations de NCF4 sont associées à la maladie granulomateuse chronique (MGC) autosomique récessive, caractérisée par des infections récurrentes.
• La protéine est phosphorylée sur des résidus spécifiques en réponse à des stimuli tels que le phorbol ester, augmentant son affinité de liaison aux membranes et contribuant à l'assemblage du complexe oxydase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 190 de NCF4/p40-phox humain (NP_038202.2), incluant le domaine PX. Validez la spécificité de l'anticorps pour l'application visée dans votre système d'échantillon correspondant.
• Pour le Western blot (WB), NCF4/p40-phox a un poids moléculaire prédit d'environ 39 kDa. Confirmez le profil de migration avec des contrôles positifs appropriés et prenez en compte les éventuelles modifications post-traductionnelles.
• L'anticorps est également adapté pour l'ELISA, il reconnaît probablement la protéine native. Un titrage et une optimisation sont recommandés pour chaque dispositif expérimental.
• Une réactivité croisée étant rapportée pour l'humain, la souris et le rat, cet anticorps peut être envisagé pour détecter p40-phox chez ces espèces, mais vérifiez la réactivité dans vos modèles spécifiques.

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