Anticorps polyclonal de lapin anti-NBS1/NBN (validé par KO) pour WB, IHC-P, ELISA - O60934

Spécifications et paramètres fondamentaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la nibrine

• NBN est un composant du complexe MRN (MRE11-RAD50-NBN), qui joue un rôle central dans la réparation des cassures double brin (DSB), la recombinaison de l’ADN, le maintien de l’intégrité des télomères et la méiose. Références associées : PMID:10888888 PMID:15616588 PMID:18411307

• Le complexe MRN assure la résection des extrémités de l’ADN endommagé afin de générer de l’ADN simple brin nécessaire à la recombinaison homologue ; il recrute également d’autres facteurs de réparation et active les kinases ATM et ATR en réponse aux dommages de l’ADN. Références associées : PMID:19759395 PMID:28867292 PMID:9705271

• Au sein du complexe MRN, NBN agit comme adaptateur protéine-protéine, reconnaissant spécifiquement les protéines phosphorylées et favorisant leur recrutement sur les sites de dommages de l’ADN, notamment MRE11, RAD50, ATM, ATR et RBBP8/CtIP. Références associées : PMID:12419185 PMID:15616588 PMID:18411307 PMID:18583988 PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:19759395 PMID:27814491 PMID:27889449 PMID:30787182 PMID:31537797

• NBN participe au maintien de la longueur des télomères par interaction avec TERF2 ; sa phosphorylation par CDK2 favorise la réparation par jonction d’extrémités non homologues au niveau des télomères, tandis que la NBN non phosphorylée favorise la jonction d’extrémités médiée par microhomologie. Références associées : PMID:10888888 PMID:28216226

• NBN augmente la phosphorylation d’AKT1, probablement en s’associant au complexe mTORC2. Références associées : PMID:23762398

• Au niveau subcellulaire, NBN se localise dans le noyau, les chromosomes, les corps nucléaires PML et les télomères.

• NBN est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux relativement élevés dans les testicules. Références associées : PMID:9590180

• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l’ubiquitination (formation de liaisons isopeptidiques).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 520–754) de la NBN humaine ; tenez compte de sa reconnaissance des formes pleine longueur et éventuellement tronquées dans vos essais.
• En western blot, une bande d’environ 85 kDa est attendue ; toutefois, confirmez le poids moléculaire dans votre système d’échantillonnage et tenez compte des éventuelles modifications post-traductionnelles susceptibles de modifier la migration.
• En immunohistochimie (IHC-P), validez la coloration dans des tissus connus pour exprimer NBN, tels que les testicules ; optimisez la récupération antigénique et la dilution de l’anticorps en fonction du type d’échantillon.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec les protéines NBN de souris et de rat ; vérifiez la réactivité spécifique à l’espèce ainsi que la spécificité du signal dans votre modèle expérimental.
• Pour les applications ELISA, testez l’anticorps avec une protéine NBN recombinante ou un revêtement peptidique, et établissez des contrôles appropriés.

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