Anticorps monoclonal anti-NBS1/NBN pour WB, IP, ELISA - O60934

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NBS1/NBN

• NBS1/NBN est un composant clé du complexe MRE11-RAD50-NBN (MRN), qui joue un rôle central dans la réparation des cassures double-brin de l'ADN (DSB), la recombinaison homologue (RH), le maintien de l'intégrité des télomères et la méiose. Références associées : PMID:10888888, PMID:15616588, PMID:18411307

• Au sein du complexe MRN, NBN agit comme un adaptateur protéine-protéine qui reconnaît et lie spécifiquement les protéines phosphorylées, médiant le recrutement de facteurs de réparation de l'ADN et de kinases de signalisation tels que MRE11, RAD50, ATM, ATR et DNA-PKcs sur les sites de DSB. Références associées : PMID:12419185, PMID:18411307, PMID:18583988, PMID:15064416, PMID:15790808

• Le complexe MRN facilite la résection des extrémités d'ADN grâce aux activités endonucléase et exonucléase de MRE11, générant de l'ADN simple brin pour la RH ; NBN recrute en outre CtIP (RBBP8) phosphorylé pour promouvoir la résection et éliminer les adduits protéine-ADN. Références associées : PMID:19759395, PMID:28867292, PMID:9705271, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182

• NBS1/NBN contribue à la régulation de la longueur des télomères en interagissant avec TERF2 pendant la phase G1 pour empêcher le recrutement de DCLRE1B/Apollo, et la phosphorylation de NBN médiée par CDK2 détermine le choix de la voie de réparation (NHEJ contre MMEJ) au niveau des télomères dysfonctionnels. Références associées : PMID:10888888, PMID:28216226

• NBN est exprimé de manière ubiquitaire avec des niveaux élevés dans le testicule et se localise au niveau du noyau, des chromosomes, des corps PML et des télomères, ce qui est cohérent avec son rôle dans la réparation de l'ADN et la régulation du cycle cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été obtenu contre un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 655-754 de NBN humain (O60934). Cette région se trouve dans le domaine C-terminal, qui médie les interactions protéine-protéine, et devrait permettre de détecter la forme pleine longueur de NBN. Pour des applications spécifiques à des isoformes, envisagez d'utiliser des peptides cartographiés sur d'autres régions.
• Les applications validées incluent le Western blot (WB), l'immunoprécipitation (IP) et l'ELISA avec des échantillons humains. Pour le WB, le poids de la protéine NBN est d'environ 85 kDa. L'expression endogène varie ; le testicule et les cellules en cycle actif donneront probablement des signaux plus élevés.
• Pour l'IP, optimisez la concentration d'anticorps et les conditions du tampon de lyse pour préserver l'intégrité du complexe MRN, car NBN est étroitement associé à MRE11 et RAD50.
• Pour l'ELISA, le peptide immunogène synthétique ou la protéine NBN recombinante peut servir d'antigène de revêtement. Incluez des contrôles appropriés.

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