Anticorps polyclonal de lapin anti-NBR1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14596

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NBR1

• NBR1 (Next to BRCA1 gene 1 protein), également appelée protéine du gène 19 inductrice de migration cellulaire ou composant membranaire marqueur de surface du chromosome 17 2, est un récepteur d'autophagie liant l'ubiquitine.
• Elle agit comme un adaptateur d'autophagie en acheminant la cargaison ubiquitinylée vers les autophagosomes et en favorisant la formation d'agrégats protéiques. Références associées : PMID:24879152, PMID:34471133, PMID:38169523
• NBR1 est impliquée dans la défense de l'hôte et l'homéostasie intracellulaire. Références associées : PMID:24692539, PMID:33577621
• Elle régule la signalisation immunitaire innée en modulant la production d'interféron de type I et en ciblant IRF3 ubiquitinylé pour sa dégradation autophagique. Références associées : PMID:35914352
• Au niveau subcellulaire, NBR1 se localise dans le cytoplasme, les autophagosomes, les lysosomes et la ligne M du sarcomère.
• Lors d'un stress oxydatif, NBR1 stabilise SQSTM1/p62 et active la voie antioxydante KEAP1-NRF2 (par similarité).
• NBR1 joue également un rôle non autophagique dans l'acheminement de l'IL-12 vers les endosomes tardifs pour sa sécrétion (par similarité).
• La protéine contient des domaines à doigt de zinc, est phosphorylée et participe aux interactions hôte-virus.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux 1-85 premiers acides aminés de NBR1 humaine ; par conséquent, l'anticorps peut détecter tous les isoformes connus, mais une validation dans le contexte spécifique de l'échantillon est recommandée.
• Pour le Western blot, utilisez un gel à gradient 4-20 % et attendez-vous à une bande à ~107 kDa en conditions réductrices ; validez avec des contrôles positifs tels que des lysats de cellules HeLa ou HEK293T.
• En IHC-P, une récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6.0) est recommandée, et nous suggérons de tester sur des coupes de muscle squelettique humain ou de tissu immunitaire connus pour exprimer NBR1.
• Pour l'IF/ICC, l'induction de l'autophagie (par exemple, par privation ou traitement à la rapamycine) peut améliorer la coloration ponctuée ; incluez des marqueurs d'autophagie appropriés comme co-marquages.
• Étant donné la réactivité croisée avec la souris et le rat, confirmez la conservation de la séquence de la région immunogène (résidus 1-85) entre l'humain et l'espèce d'intérêt avant utilisation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement avec un anticorps monoclonal anti-NBR1 peut améliorer les performances du test en sandwich.

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