Anticorps polyclonal de lapin anti-N4BP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - O75113

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de N4BP1

• N4BP1 (protéine de liaison à NEDD4 1) est un puissant suppresseur de la production de cytokines et un régulateur négatif clé de la signalisation immunitaire innée, limitant les réponses inflammatoires aux stimuli TLR mineurs.
• Agit comme un facteur de restriction contre le VIH-1 en se liant aux ARNm viraux et en les dégradant grâce à son activité ribonucléasique intrinsèque. Références connexes : PMID:31133753
• Lors d'une infection par des pathogènes plus menaçants, N4BP1 est clivé par CASP8 en aval de TLR3 ou TLR4, entraînant son inactivation et permettant une production complète de cytokines.
• Inhibe la ligase E3 ubiquitine-protéine ITCH en entrant en compétition pour la liaison au substrat via le deuxième domaine WW de ITCH, entravant l'ubiquitination.
• Se localise dans le cytoplasme, le cytosol, le noyau, le nucléole et les corps nucléaires PML, indiquant une distribution cellulaire multifonctionnelle.
• Détecté dans un large éventail de tissus, notamment le cœur, le poumon, le cerveau, le foie, le muscle squelettique, le pancréas, le rein, la rate, les testicules et l'ovaire.
• Les mots-clés d'UniProt soulignent ses rôles d'hydrolase, de nucléase, de protéine liant l'ARN et de phosphoprotéine impliquée dans l'immunité innée.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 190–590 de N4BP1 de souris, une région contenant le domaine NYN (RNase) et une partie de la région d'interaction avec ITCH. Cette conception est censée produire un anticorps qui reconnaît la N4BP1 de pleine longueur dans des conditions dénaturantes et natives.
• Pour le Western blot, envisagez une plage de dilution initiale de 1:500–1:2000 et validez avec des témoins positifs pertinents (par exemple, des lysats cellulaires humains ou de souris connus pour exprimer N4BP1).
• En immunofluorescence/ICC, confirmez la localisation nucléaire et cytoplasmique avec des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés ; l'inclusion de marqueurs de corps PML peut aider aux études de colocalisation.
• L'anticorps est validé pour ELISA, potentiellement adapté pour la capture ou la détection dans les dosages sandwich ; optimisez les conditions de revêtement et de détection pour votre format spécifique d'immunoessai.
• La réactivité croisée avec le N4BP1 humain et de souris est spécifiée ; cependant, vérifiez la spécificité dans votre système expérimental, surtout si vous travaillez avec des échantillons d'autres espèces.

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