Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Myéloperoxydase (Mpo) pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11247

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Myéloperoxydase (Mpo)

• La myéloperoxydase (Mpo) est une peroxydase contenant de l'hème et du fer, fortement exprimée dans les granules azurophiles des neutrophiles, fonctionnant comme un homodimère de chaînes lourdes et légères glycosylées liées par des ponts disulfures.
• En tant qu'effecteur clé de l'immunité innée, le Mpo catalyse la conversion du peroxyde d'hydrogène et des ions chlorure en acide hypochloreux (HOCl), un oxydant microbicide puissant.
  Références connexes : PMID:11593004
• Le Mpo est central dans la formation des pièges extracellulaires des neutrophiles (NETs), un processus au cours duquel il transloque vers le noyau, perturbe les nucléosomes et favorise la décondensation de la chromatine pour former des réseaux d'ADN extracellulaire qui piègent les pathogènes.
  Références connexes : PMID:10085024, PMID:23306200
• L'activité microbicide directe du Mpo est amplifiée par sa capacité à oxyder divers substrats, générant des espèces réactives supplémentaires telles que l'acide hypobromeux, le radical dioxyde d'azote et les radicaux tyrosyle protéiques.
• Le Mpo est une protéine multi-compartimentée : stockée dans les granules azurophiles cytoplasmiques, transloquée vers les phagosomes lors de l'infection et sécrétée activement ; lors de la NETose, il se localise dans le noyau et sur les chromosomes.
• L'activité de l'enzyme est dépendante du calcium, et sa forme mature est stabilisée par des ponts disulfures intrachaînes, avec des modifications post-traductionnelles incluant la N-glycosylation critiques pour un repliement et une activité appropriés.
• De plus, le Mpo contribue aux dommages tissulaires inflammatoires en chlorant et nitrant les protéines de l'hôte, telles que l'apolipoprotéine A-I, altérant ainsi l'efflux du cholestérol et favorisant l'athérosclérose.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène, une protéine recombinante couvrant les acides aminés 16 à 718 du Mpo de souris, couvre presque toute la séquence précurseur (à l'exclusion du peptide signal), suggérant que l'anticorps pourrait reconnaître à la fois le pro-enzyme et les chaînes lourdes/légères traitées.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 81 kDa pour le précurseur ; dans des conditions réductrices, les chaînes lourdes (~60 kDa) et légères (~15 kDa) peuvent également être détectées en fonction du traitement de l'échantillon et du type cellulaire.
• Pour l'immunofluorescence et l'immunohistochimie, envisagez d'optimiser les protocoles de perméabilisation et de récupération d'antigène pour détecter le Mpo dans les granules azurophiles (cytoplasmiques), les phagosomes, ou lors de la NETose lorsque la localisation nucléaire se produit.
• L'anticorps est validé pour ELISA ; assurez-vous de conditions d'enrobage appropriées et incluez des étapes de blocage et de lavage adéquates pour minimiser le bruit de fond.
• La réactivité croisée avec le Mpo humain et de rat a été démontrée, mais l'intensité du signal peut varier ; validez les séries de dilutions dans le contexte de l'espèce et du tissu concernés.

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