Ac monoclonal de lapin anti-myéloperoxydase (MPO) pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05164

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la myéloperoxydase (MPO)

• La myéloperoxydase est une hémoprotéine contenant du fer, exprimée spécifiquement dans les neutrophiles et les monocytes. Elle est synthétisée sous forme de précurseur, puis transformée en chaînes légère et lourde.
• Elle participe à la formation des pièges extracellulaires des neutrophiles (NET) : elle se transloque vers le noyau, se lie aux nucléosomes et induit la décondensation de la chromatine ainsi que l’extrusion de l’ADN, piégeant ainsi les agents pathogènes. Références associées : PMID:40963017
• Elle agit comme une peroxydase pour produire de l’acide hypochloreux (HOCl) et d’autres acides hypohalogénés (HOBr, HOI, HOSCN) en présence de H₂O₂, renforçant ainsi l’activité microbicide. Références associées : PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335, PMID:1318692
• Elle catalyse l’oxydation du nitrite en radical dioxyde d’azote et génère des espèces réactives qui chlorent et nitrent les résidus protéiques (par ex. APOA1), altérant ainsi le transport du cholestérol. Références associées : PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756, PMID:15314690, PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• Elle oxyde la mélatonine et l’urate, agit comme une oxydase de l’oxyde nitrique régulant le tonus vasculaire et clive l’alpha-1-microglobuline pour produire une forme qui inhibe l’oxydation des LDL. Références associées : PMID:15636586, PMID:16148002, PMID:21266577, PMID:12089442, PMID:25698971
• L’activité peroxydase est inhibée par l’inhibiteur de peroxydase SPIN de S. aureus, qui bloque l’accès du substrat à l’hème catalytique.
• Elle se localise principalement dans les lysosomes et les granules cytoplasmiques des neutrophiles ; lors de l’activation, elle est sécrétée ou transloquée vers le noyau et peut s’associer aux chromosomes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est de 84 kDa ; validez-le à l’aide de contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de neutrophiles ou de monocytes. Confirmez le profil de bandes attendu en tenant compte du précurseur et des chaînes transformées.
• Pour l’IHC-P, une récupération antigénique peut être nécessaire ; optimisez la procédure en utilisant des coupes FFPE de tissus riches en neutrophiles, par exemple la moelle osseuse ou des tissus inflammés.
• Pour l’IF/ICC, envisagez des protocoles de perméabilisation afin d’accéder à la MPO intracellulaire granulaire et nucléaire ; utilisez un blocage approprié pour réduire les liaisons non spécifiques.
• Incluez des contrôles négatifs appropriés et envisagez de tester la réactivité croisée dans des échantillons de souris et de rat, comme indiqué.
• Les performances en ELISA doivent être validées avec de la MPO recombinante ou une protéine native présente dans des fluides biologiques pertinents.

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