Anticorps monoclonal anti-MUC4 pour WB, IHC-P, ELISA - Q99102

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MUC4

• MUC4 est une glycoprotéine transmembranaire de haut poids moléculaire (542 kDa) appartenant à la famille des mucines, caractérisée par une O-glycosylation extensive et un grand domaine extracellulaire comportant des répétitions de type EGF.
• Elle constitue un composant majeur de la couche de mucus, formant une barrière protectrice sur les surfaces épithéliales et contribuant au renouvellement et à la différenciation des cellules épithéliales. Références associées : PMID:10880978
• MUC4 fonctionne comme ligand intramembranaire du récepteur tyrosine kinase ERBB2, induisant la phosphorylation d'ERBB2 et modulant les voies de signalisation en aval pour influencer la prolifération cellulaire, la différenciation et l'apoptose ; elle peut former des complexes avec ERBB3 et NRG1 qui répriment l'apoptose et favorisent la croissance tumorale. Références associées : PMID:10880978
• La protéine subit un épissage alternatif et contient des ponts disulfures, des domaines de type EGF et une hélice transmembranaire ; elle est annotée avec des mots-clés tels que glycoprotéine, adhésion cellulaire et sécrétée (en référence à son ectodomaine éliminé par clivage).
• La localisation subcellulaire inclut la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I, mais l'ectodomaine peut être clivé et sécrété ; il se trouve dans les fractions membranaire et sécrétée.
• L'expression tissulaire est large : expression normale dans le thymus, la thyroïde, le poumon, la trachée, l'œsophage, l'estomac, l'intestin grêle, le côlon, le testicule, la prostate, l'ovaire, l'utérus, le placenta, les glandes mammaires et salivaires ; elle est surexprimée dans de multiples carcinomes, notamment les cancers du pancréas, du poumon, du sein, des voies biliaires, du côlon et du col de l'utérus, tandis qu'elle est minimale dans le pancréas normal.
• Compte tenu de son rôle dans la modulation de l'adhésion cellulaire et l'interaction avec ERBB2, MUC4 est impliquée dans la transition épithélio-mésenchymateuse et la progression cancéreuse, ce qui en fait un marqueur précieux pour la recherche en oncologie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région de la partie C-terminale de MUC4 (acides aminés 4807-4916), qui fait partie du domaine extracellulaire. Cette région peut être moins glycosylée que la région de répétitions en tandem, offrant potentiellement une spécificité plus élevée pour la détection de la protéine core.
• Compte tenu de la grande taille de MUC4 (542 kDa), envisagez l'utilisation d'un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 4-6%) pour le western blot afin d'améliorer l'efficacité du transfert. Des temps de transfert prolongés et une basse tension peuvent améliorer la détection.
• Pour l'IHC-P, des méthodes de récupération d'antigène (telles que la récupération d'épitopes induite par la chaleur dans un tampon citrate, pH 6,0) peuvent être nécessaires ; une validation sur des contrôles tissulaires positifs et négatifs connus (par exemple tumeur pancréatique contre pancréas normal) est recommandée.
• Une réactivité croisée avec le rat a été rapportée ; une validation sur des échantillons de rat doit être réalisée pour confirmer l'adéquation pour les études sur rongeurs.
• En raison du poids moléculaire élevé et de la glycosylation importante, la préparation de lysat peut nécessiter une sonication et l'utilisation de conditions dénaturantes pour garantir la solubilité.

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