Anticorps polyclonal anti-MT-ATP6 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P00846

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de MT-ATP6

• MT-ATP6 code la sous-unité a du complexe F(0) de la synthase d’ATP, également connue sous le nom de protéine 6 de la F-ATPase, qui constitue un composant essentiel du complexe V de la chaîne respiratoire mitochondriale.
• La sous-unité a coopère avec la sous-unité c (ATP5MC1) pour former le canal conducteur de protons dans le domaine F(0), permettant la synthèse d’ATP grâce au mécanisme catalytique rotatif.
• La protéine est située dans la membrane interne mitochondriale et la traverse à plusieurs reprises, créant deux demi-canaux pour la translocation des protons via un mécanisme de Grotthuss.
  Références associées : PMID:37244256
• Les mutations de MT-ATP6 sont associées à des maladies mitochondriales, notamment la neuropathie optique héréditaire de Leber, le syndrome de Leigh, la neuropathie, l’ataxie et la rétinite pigmentaire (comme indiqué dans les mots-clés de maladies d’UniProt).
• La protéine est fortement conservée chez l’humain, la souris et le rat, ce qui suggère un potentiel de réactivité croisée.
• Avec un poids moléculaire d’environ 25 kDa (24 817 Da selon le calcul), elle migre sous forme d’une bande distincte en SDS-PAGE dans des conditions appropriées.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène cible la séquence N-terminale correspondant aux acides aminés 1-100 de la protéine humaine MT-ATP6, dont il est prédit qu’elle fait face à la matrice mitochondriale. Par conséquent, la perméabilisation membranaire est essentielle pour permettre l’accès à l’épitope en IF/ICC et en IHC-P.
• En Western blot, une bande proche de 25 kDa est attendue. L’enrichissement des fractions mitochondriales peut améliorer le rapport signal/bruit.
• En immunomarquage, une co-localisation avec un marqueur mitochondrial (par exemple, MitoTracker ou anti-ATP5A) est recommandée pour confirmer la spécificité.
• Des méthodes de récupération antigénique (induites par la chaleur ou enzymatiques) peuvent être nécessaires pour les coupes incluses en paraffine et fixées au formol en IHC-P ; effectuez des essais sur des tissus riches en mitochondries (cœur, muscle squelettique).
• Ces recommandations sont fondées sur les propriétés de l’immunogène et la biologie de la cible ; chaque laboratoire doit établir son propre protocole optimisé.

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