Anticorps Monoclonaux Anti-MSH6 pour WB, IF/ICC, ELISA - P52701

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du MSH6

• Le MSH6 code la protéine de réparation des mésappariements de l'ADN Msh6, également connue sous le nom de GTBP, GTMBP, homologue de la protéine MutS 6 et p160, un composant clé du système de réparation des mésappariements post-réplicatif (MMR).
• Il hétérodimérise avec MSH2 pour former le complexe MutS alpha, qui reconnaît les mésappariements de base unique et les petites boucles d'insertion-délétion, initiant la réparation de l'ADN.
• MutS alpha se lie à l'ADN mésapparié, courbe l'hélice, protège environ 20 paires de bases et recrute MutL alpha pour diriger les événements de réparation en aval, notamment la discrimination des brins, l'excision et la resynthèse.
• La liaison et l'hydrolyse de l'ATP par MSH6 agissent comme un interrupteur moléculaire : l'ADN mésapparié déclenche l'échange ADP→ATP, induisant un changement conformationnel qui convertit MutS alpha en une pince coulissante pour la diffusion le long de l'ADN.
• Le domaine PWWP du MSH6 se lie spécifiquement à la lysine 36 triméthylée de l'histone H3 (H3K36me3), médiant son recrutement à la chromatine en phase G1 et début de phase S pour lier la réplication de l'ADN à la reconnaissance des mésappariements.
• Localisé dans le noyau et sur les chromosomes, le MSH6 est essentiel pour le maintien de la stabilité génomique ; son dysfonctionnement est associé au syndrome de Lynch (cancer colorectal héréditaire sans polypose) et à d'autres malignités.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 153 kDa, cohérent avec sa masse prédite de 152 786 Da, et subit des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–100) du MSH6 humain, qui contient le domaine PWWP ; tenez compte du fait que l'épitope peut être masqué par les interactions H3K36me3 dans la chromatine fixée.
• Pour le Western blot, une bande autour de 153 kDa est attendue ; en raison de la grande taille, utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés.
• En IF/ICC, attendez-vous à un marquage nucléaire ; la colocalisation avec des marqueurs de chromatine peut nécessiter une optimisation de la perméabilisation.
• Confirmez la réactivité croisée avec les échantillons de souris et de rat (humain, souris, rat validés), mais vérifiez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène pour d'autres espèces avant utilisation.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un appariement avec un anticorps de détection approprié ; envisagez le revêtement direct avec le peptide synthétique ou le MSH6 recombinant.

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