Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-MSH2 (Validé KO) pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P43246

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de MSH2

• MSH2 est un composant central du système de réparation des mésappariements de l'ADN (MMR), essentiel pour le maintien de la stabilité génomique en corrigeant les mésappariements base-base et les boucles d'insertion-délétion (IDL) qui surviennent lors de la réplication de l'ADN.
• Il forme deux hétérodimères : MutSα avec MSH6, qui reconnaît les mésappariements de bases uniques et les petites IDL (1–2 nucléotides), et MutSβ avec MSH3, qui reconnaît les IDL plus grandes jusqu'à 13 nucléotides.
• Lors de la liaison au mésappariement, l'hétérodimère MutS courbe l'ADN et protège environ 20 paires de bases, recrutant ensuite l'hétérodimère MutLα (MLH1-PMS2) pour former un complexe ternaire qui dirige les événements de réparation en aval, incluant la discrimination de brin, l'excision et la resynthèse.
• MSH2 recrute l'hélicase d'ADN MCM9 sur la chromatine, qui déroule le brin d'ADN contenant le mésappariement pour faciliter la réparation (PubMed:26300262).
  Références connexes :
  PMID:26300262
• L'activité ATPase de MutSα fonctionne comme un interrupteur moléculaire : la liaison au mésappariement déclenche l'échange ADP→ATP, induisant un changement conformationnel qui convertit MutSα en une pince coulissante capable de diffuser le long de l'ADN, une étape critique pour le MMR.
• Au-delà du MMR, MSH2 peut également participer à la réparation par recombinaison homologue de l'ADN et module la régulation du cycle cellulaire et l'apoptose induites par les UV-B dans les mélanocytes.
• MSH2 est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus et se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, et les mutations de MSH2 sont associées au cancer colorectal héréditaire sans polypose (HNPCC/syndrome de Lynch).

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande spécifique près de 105 kDa. Incluez un échantillon validé par knockout (KO) pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Dans les tests d'immunoprécipitation (IP), l'anticorps peut permettre d'isoler MSH2 et ses partenaires de liaison (ex: MSH6, MSH3, MLH1). Optimisez les conditions de tampon pour préserver les interactions protéiques.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), anticipez une localisation nucléaire. Utilisez des méthodes de fixation et de perméabilisation appropriées pour assurer l'accessibilité à la cible.
• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–300) ; les épitopes dans cette région sont probablement bien exposés et conservés, ce qui pourrait soutenir la réactivité croisée avec le rat.
• Lors de l'utilisation de l'ELISA, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale d'enrobage et la plage de détection ; envisagez un format direct ou sandwich en fonction de la conception du test.

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