Anticorps polyclonal Anti-MSH2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P43246

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine de réparation des mésappariements de l'ADN Msh2

• Composant central du système de réparation des mésappariements de l'ADN post-réplicatif (MMR). Forme deux hétérodimères : MutS alpha (avec MSH6) et MutS beta (avec MSH3), qui se lient à l'ADN mésapparié pour initier la réparation.
• MutS alpha reconnaît les mésappariements de base unique et les petites boucles d'insertion-délétion (1–2 nucléotides), tandis que MutS beta reconnaît des boucles plus importantes allant jusqu'à 13 nucléotides.
• Lors de la liaison, les hétérodimères courbent l'ADN, protègent environ 20 paires de bases et recrutent MutL alpha pour coordonner la discrimination des brins, l'excision et la resynthèse.
• Recrute l'hélicase ADN MCM9 vers la chromatine, facilitant le déroulement du brin contenant le mésappariement. Références connexes : PMID:26300262
• La liaison et l'hydrolyse de l'ATP agissent comme un interrupteur moléculaire : l'ADN mésapparié déclenche l'échange ADP→ATP, convertissant MutS alpha en une pince coulissante qui diffuse le long de l'ADN et permet les événements de réparation en aval.
• Joue également un rôle dans la réparation par recombinaison homologue de l'ADN, et dans les mélanocytes, il peut moduler la régulation du cycle cellulaire et l'apoptose induites par les UV-B.
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire et associée aux chromosomes, cohérente avec sa fonction de surveillance génomique. Expression ubiquitaire dans les tissus.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination. Agit comme un suppresseur de tumeur ; les mutations sont associées au cancer colorectal héréditaire sans polypose (HNPCC/syndrome de Lynch).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les 300 acides aminés N-terminaux du MSH2 humain. En tant qu'anticorps polyclonal, il reconnaît plusieurs épitopes dans cette région, ce qui peut permettre une détection robuste, mais la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée.
• Le poids moléculaire attendu est de 105 kDa. Les témoins positifs appropriés incluent les lignées cellulaires humaines couramment utilisées (p. ex., HeLa, HEK293) et les tissus de souris/rat, compte tenu de l'expression ubiquitaire du MSH2.
• Pour le Western blot (WB), des protocoles standard peuvent être employés ; envisagez d'optimiser le blocage et la dilution de l'anticorps pour le type d'échantillon spécifique.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), prévoyez un marquage nucléaire. Utilisez des méthodes de fixation et de perméabilisation appropriées pour préserver les antigènes nucléaires.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet des études translationnelles, mais une validation dans le système d'échantillon pertinent est recommandée.

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