Anticorps Monoclonal Anti-Mouse Ki67 () pour Cytométrie en Flux (Intracellulaire) - E9PVX6

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Ki67

• Ki67, codé par le gène Mki67, est une grande protéine marqueur de prolifération d'un poids moléculaire d'environ 351 kDa (350864 Da selon UniProt) qui s'associe aux chromosomes mitotiques. Il agit comme un répulsif de chromosomes lors de la mitose précoce et comme un attractant lors de la mitose tardive, assurant une dispersion et un regroupement appropriés des chromosomes (PubMed:27362226). Références connexes : PMID:27362226
• Lors de la mitose précoce, Ki67 se relocalise des nucléoles vers la surface des chromosomes, formant des structures étendues en forme de brosse. Ces structures fournissent une barrière stérique et électrostatique, agissant comme un tensioactif pour empêcher l'effondrement des chromosomes et permettre leur mobilité indépendante (PubMed:27362226). Références connexes : PMID:27362226
• En anaphase, la déphosphorylation de Ki67 et l'exposition d'un patch basique conservé déclenchent une séparation de phase liquide-liquide dépendante de l'ARN à la surface des chromosomes, favorisant le regroupement des chromosomes et facilitant la réassemblage nucléaire. Cette transition de phase fait passer Ki67 de répulsif à attractant.
• Ki67 se lie à l'ADN avec une préférence pour l'ADN superenroulé et riche en AT, et se lie également aux ARN ribosomiques prématurés lors de l'anaphase, ce qui contribue à la séparation de phase. Cependant, il ne contribue pas à la structure interne des chromosomes mitotiques (PubMed:26949251). Références connexes : PMID:26949251
• Au niveau subcellulaire, Ki67 se localise dans le nucléole pendant l'interphase et transloque vers la surface des chromosomes pendant la mitose. Il est principalement exprimé dans les cellules en prolifération, servant de marqueur fiable de l'activation du cycle cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui régulent ses fonctions mitotiques et sa localisation dynamique.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, utilisez une méthode de perméabilisation compatible avec les antigènes nucléaires, telle que le méthanol ou des tampons à base de saponine, pour assurer l'accès de l'anticorps au Ki67 dans le nucléole et sur les chromosomes.
• Titrez l'anticorps entre 0,1 et 1 µg pour 10^6 cellules pour déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire et votre protocole spécifiques.
• Incluez un témoin positif, tel que des lignées cellulaires de souris en prolifération (ex: NIH/3T3, CTLL-2) ou des lymphocytes primaires stimulés, et un témoin négatif (ex: témoin isotypique ou cellules au repos) pour valider la spécificité du marquage.
• Fixez les cellules rapidement pour préserver la distribution du Ki67 ; un stockage prolongé peut affecter l'intégrité de l'épitope. La fixation au paraformaldéhyde suivie d'une perméabilisation est couramment utilisée.
• Le conjugué est compatible avec la détection par laser rouge standard (633–647 nm) ; assurez-vous d'utiliser des jeux de filtres appropriés et une compensation minimale en cas de multiplexage.

CamelBio : Votre Pont d'Approvisionnement Tout-en-Un

CamelBio est votre partenaire dédié pour l'approvisionnement en matières premières pour DIU, offrant un portefeuille complet du concept à la clinique. Cet anticorps anti-Ki67 fait partie de notre gamme de marqueurs de prolifération cellulaire et d'oncologie, soutenu par notre capacité à fournir des paires d'anticorps validées, des protéines recombinantes optimisées et des réactifs auxiliaires. Que vous ayez besoin d'anticorps monoclonaux en vrac ou de solutions de matières premières personnalisées pour le développement de diagnostics, contactez CamelBio pour un support fiable et tout-en-un.