Anticorps monoclonal anti-souris IL-12 p40 () pour cytométrie en flux intracellulaire - P43432

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL-12 p40

• L'IL-12 p40 est une sous-unité de l'interleukine-12 (IL-12) et de l'interleukine-23 (IL-23), cytokines centrales dans la régulation immunitaire.
• Dans l'IL-12, elle s'associe à la p35 pour former l'IL-12p70 biologiquement active, qui favorise la différenciation Th1 et la production d'IFN-γ.
• En tant que composant de l'IL-23, la p40 s'associe à la p19 (IL23A) pour stimuler les réponses Th17 et la libération de cytokines pro-inflammatoires.
• L'IL-12 p40 agit comme un facteur de croissance pour les cellules T et NK activées, améliorant leur activité lyrique et stimulant la sécrétion d'IFN-γ par les PBMC au repos.
• Sa signalisation via le récepteur de l'IL-12 active la voie Jak-Stat, reliant l'immunité innée et adaptative.
• C'est une glycoprotéine sécrétée avec un peptide signal, un domaine de type immunoglobuline et des ponts disulfure, reflétant sa structure de cytokine.
• Le gène Il12b de souris (Identifiant du gène : 16160) code un précurseur de 335 acides aminés, le poids de la protéine mature étant d'environ 38 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 23–335 de l'IL-12 p40 de souris, couvrant la majeure partie du domaine extracellulaire ; l'anticorps peut détecter à la fois la sous-unité libre et la p40 au sein des hétérodimères IL-12/IL-23.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, optimisez les conditions de perméabilisation et titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale.
• Incluez des contrôles isotypiques appropriés et utilisez des cellules immunitaires de souris activées (par exemple, macrophages ou cellules dendritiques stimulés par LPS/IFN-γ) comme contrôles positifs.
• Étant donné que l'IL-12 p40 est sécrétée, un inhibiteur du transport protéique (par exemple, la bréfeldine A) peut être nécessaire pour retenir la cytokine à l'intérieur de la cellule avant la coloration.

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