Anticorps monoclonal anti-IgM de souris pour WB, IHC-P, FC, ELISA - P01872

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la région constante de la chaîne lourde IgM

• Identité de la protéine et isoformes : La cible est la chaîne lourde constante mu (chaîne mu Ig), codée par le gène Ighm (alias Igh-6). Elle constitue la région constante des anticorps IgM et existe sous forme d'isoformes sécrétées (sIgM) et liées à la membrane (mIgM) par épissage alternatif.
• Liaison à l'antigène et assemblage du domaine variable : Dans l'immunité humorale, les domaines variables d'une chaîne lourde et d'une chaîne légère forment le site de liaison à l'antigène. Ces domaines sont assemblés par réarrangement V-(D)-J et subissent une hypermutation somatique pour la maturation de l'affinité après exposition à l'antigène (par similarité).
• Multimérisation et polyréactivité des IgM sécrétées : Les sIgM se multimérisent en pentamères ou hexamères pour une liaison à haute avidité avec l'antigène. Les sIgM naturelles sont polyréactives, reconnaissant des structures conservées du soi et des agents pathogènes, tandis que les sIgM immunes sont spécifiques à l'antigène ; les deux sont essentielles pour une réponse humorale efficace. Références associées : PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Fonctions effectrices via les récepteurs Fc et le complément : Les fonctions effectrices des sIgM sont médiées par le récepteur Fc à haute affinité FCMR sur les cellules lymphoïdes, favorisant les réponses IgG et la tolérance au soi, et en recrutant C1q pour activer la voie classique du complément, facilitant la neutralisation des agents pathogènes et la phagocytose des cellules apoptotiques. Références associées : PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Immunité muqueuse et transcytose : Sur les surfaces muqueuses, les sIgM sont transportées à travers l'épithélium par le PIGR et sécrétées avec le composant sécrétoire. Les complexes IgM-antigène peuvent être rétro-transcytosés via le FCMR à travers les cellules M vers les tissus lymphoïdes. Références associées : PMID:34788614
• Signalisation BCR des IgM liées à la membrane : En tant que partie du complexe récepteur des lymphocytes B, les IgM liées à la membrane fournissent une signalisation tonique constitutive nécessaire à la survie des lymphocytes B et assurent la signalisation pré-BCR qui régule le réarrangement des gènes des immunoglobulines et l'exclusion allélique.
• Localisation subcellulaire et expression tissulaire : La protéine est située sur la membrane cellulaire (en tant que composant du BCR) et est sécrétée. Elle est exprimée dans la moelle osseuse et dans les cellules B-1 et B-2 au niveau protéique.
• Modifications post-traductionnelles et mots-clés structurels : Caractérisée par des ponts disulfures, une glycosylation liée à l'azote (N-linked), des domaines immunoglobulines et une hélice transmembranaire (dans l'isoforme liée à la membrane). Mots-clés : pont disulfure, glycoprotéine, domaine immunoglobuline, membrane, sécrété, transmembranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 105-454 de l'Ighm de souris (P01872), correspondant à une région située dans le domaine constant. Cette conception peut cibler des épitopes conservés entre les isoformes sécrétées et liées à la membrane, permettant potentiellement la détection des deux formes.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit de la cible est d'environ 50–53 kDa dans des conditions réductrices. Pensez à utiliser des contrôles appropriés, tels que des lysats de rate de souris ou des IgM purifiées, et validez le profil des bandes dans votre système d'échantillons.
• En immunohistochimie sur tissus inclus en paraffine (IHC-P), la récupération d'antigène optimale et la dilution de l'anticorps doivent être déterminées expérimentalement. L'anticorps est destiné à être utilisé sur des tissus de souris ; aucune réactivité croisée avec d'autres espèces n'a été rapportée.
• Pour la cytométrie en flux (FC), assurez-vous d'un blocage approprié des récepteurs Fc et utilisez des réactifs de détection directement conjugués ou secondaires compatibles avec le format monoclonal de lapin. Une pré-validation du marquage sur des populations de lymphocytes B de souris (par exemple, splénocytes) est recommandée.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection des IgM de souris. Envisagez de l'associer à un anticorps de détection approprié pour les configurations ELISA en sandwich et validez la sensibilité et la spécificité du test.

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