Anticorps monoclonal anti-souris CD44 pour IF/ICC et FC - P15379

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD44

• Code pour l'antigène CD44, également appelé récepteur de la matrice extracellulaire III (ECMR-III), récepteur d'homéing/adésion des lymphocytes GP90, HUTCH-I, antigène Hermes, récepteur de l'hyaluronate, antigène lymphocyte 24 (Ly-24) et glycoprotéine phagocytaire 1 (PGP-1/PGP-I). Plusieurs isoformes sont produites par épissage alternatif.
• Agit comme un récepteur de surface cellulaire qui médie les interactions cellule-cellule, l'adhésion et la migration, permettant aux cellules de détecter et répondre au microenvironnement tissulaire. Participe à l'activation des lymphocytes T, leur recirculation et leur homéing, l'hématopoïèse, l'inflammation et la réponse à l'infection bactérienne. Son domaine ectoplasmique interagit avec des composants de la matrice extracellulaire tels que l'hyaluronane, le collagène, les facteurs de croissance, les cytokines et les protéases, tandis que son domaine cytoplasmique assemble des complexes de signalisation avec les kinases réceptrices, PKN2, les RhoGTPases RAC1 et RHOA, les Rho-kinases et la phospholipase C pour promouvoir la mobilisation du calcium et la réorganisation du cytosquelette d'actine. Références associées : PMID:25065622 PMID:8343954
• Après liaison au ligand LGALS9, active les voies de signalisation LCK, ERK et MAPK pour stimuler l'activation des cellules tueuses naturelles (NK). Références associées : PMID:37006235
• Se localise principalement sur la membrane cellulaire et les microvillosités ; une forme sécrétée est également produite.
• Est spécifiquement exprimé dans l'épithélium intestinal dans des conditions normales.
• Contient des modifications post-traductionnelles clés notamment des ponts disulfure, la glycosylation, la phosphorylation, la sulfation et l'attachement de protéoglycanes, qui sont essentiels pour sa diversité structurelle et fonctionnelle.
• Appartient à une famille de récepteurs d'adhésion présentant une homologie structurelle et partage des rôles fonctionnels dans la surveillance immunitaire et l'homéostasie tissulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 23-176 (dom extracellulaire) ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître le CD44 de surface cellulaire. Vérifiez la réactivité avec les isoformes spécifiques qui vous intéressent, car l'épissage alternatif peut produire des variants ne possédant pas cette région.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), envisagez de fixer les cellules avec du paraformaldéhyde et de réaliser une perméabilisation appropriée. Validez la coloration sur des lignées cellulaires ou des tissus de souris connus pour exprimer CD44 (par exemple l'épithélium intestinal).
• Pour la cytométrie en flux (FC), diluez l'anticorps selon une gamme de titrage pour déterminer la dilution de travail optimale adaptée à votre type cellulaire et votre dispositif expérimental. Incluez des contrôles d'isotype appropriés.
• Le conjugué offre une fluorescence brillante et photostable ; évitez une exposition prolongée à la lumière et utilisez-le dans les conditions de stockage recommandées.
• Comme CD44 peut être éliminé de la surface cellulaire par clivage, évaluez à la fois les protocoles de coloration de surface et intracellulaire si les formes sécrétées ou internalisées sont concernées par votre étude.

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