Anticorps monoclonal anti-CD272/BTLA de souris () pour cytométrie en flux - Q7TSA3

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD272/BTLA

• CD272 (BTLA) est un atténuateur des lymphocytes B et T, un récepteur inhibiteur appartenant à la superfamille des immunoglobulines. Il contient un domaine extracellulaire d’immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique comprenant des motifs inhibiteurs basés sur la tyrosine des immunorécepteurs (ITIM).
• Le BTLA régule négativement la signalisation des récepteurs antigéniques dans les lymphocytes en recrutant les tyrosine phosphatases protéiques SHP-1 et SHP-2. Références associées : PMID:12796776 PMID:14652006
• Il interagit avec TNFRSF14 (HVEM) en cis (sur la même cellule) ou en trans (entre les cellules). Les interactions en cis maintiennent un état de repos dans les lymphocytes T naïfs, tandis que les interactions en trans fournissent des signaux de survie aux lymphocytes T effecteurs au cours des réponses immunitaires adaptatives. Références associées : PMID:19915044
• Il est exprimé dans les lymphocytes T et B spléniques, les tissus des ganglions lymphatiques, ainsi que dans les macrophages, les cellules NK et les cellules dendritiques. Une distribution tissulaire polymorphe est observée entre différentes souches de souris.
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à passage unique, avec un peptide signal N-terminal clivé au cours de la maturation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation, et sa structure contient des ponts disulfure importants pour la stabilité du domaine d’immunoglobuline.
• L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes, bien que leur importance fonctionnelle chez la souris ne soit pas entièrement caractérisée.
• Il participe largement à l’immunité adaptative, et des données structurelles tridimensionnelles sont disponibles.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps est directement conjugué à l’, un colorant fluorescent rouge adapté à la détection par cytométrie en flux. Il est recommandé de titrer l’anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre système expérimental.
• Généré contre le domaine extracellulaire (acides aminés 30-176), il reconnaît probablement le récepteur natif présent à la surface cellulaire. Incluez des contrôles d’isotype appropriés afin de garantir la spécificité.
• Pour le marquage des cellules immunitaires, combinez-le avec des marqueurs de lignée afin de sélectionner des populations spécifiques (par exemple, les cellules T, les cellules B et les cellules NK).
• Les protocoles standard de marquage pour la cytométrie en flux (par exemple, 30 min à 4 °C) sont applicables, mais validez les étapes de fixation, car elles peuvent affecter la reconnaissance de l’épitope.
• Comme il s’agit d’un anticorps monoclonal de lapin, il peut être détecté avec un réactif secondaire anti-IgG de lapin si nécessaire, bien que le conjugué direct permette d’éliminer cette étape.

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