Anticorps monoclonal anti-souris CD140b/PDGFR bêta conjugué à la PE pour cytométrie en flux - P05622

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD140b/PDGFR bêta

• PDGFRB (également connu sous le nom de CD140b, PDGFR-1) est un récepteur tyrosine kinase qui se lie aux ligands du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF), notamment PDGFB, PDGFD et les hétérodimères PDGFA/PDGFB. Il est essentiel au développement embryonnaire, à la prolifération cellulaire, à la survie, à la différenciation, la chimiotaxie et la migration cellulaires.
• Ce récepteur joue un rôle déterminant dans le développement des vaisseaux sanguins en favorisant la prolifération, la migration et le recrutement des péricytes et des cellules musculaires lisses vasculaires vers les cellules endothéliales ; il est indispensable à la formation normale du système cardiovasculaire et à la ramification des capillaires glomérulaires dans le rein.
• PDGFRB appartient à la famille des récepteurs du PDGF et peut former des homodimères ou des hétérodimères avec PDGFRA, les résultats de la signalisation étant modulés par la spécificité du ligand et la composition du dimère récepteur.
• Après liaison du ligand, PDGFRB active plusieurs cascades de signalisation en aval, notamment les voies PLCG1, PI3K-AKT et RAS-MAPK, ce qui entraîne des réarrangements du cytosquelette, des ondulations membranaires et des réponses transcriptionnelles.
• Le récepteur est principalement localisé sur la membrane cellulaire, mais se trouve également dans les vésicules cytoplasmiques et la lumière du lysosome après internalisation, ce qui contribue à l'atténuation du signal.
• PDGFRB subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'autophosphorylation sur plusieurs résidus tyrosine, la glycosylation N-liée et l'ubiquitination ; il contient des domaines de type immunoglobuline, un insert kinase et un domaine tyrosine kinase divisé.
• Chez l'adulte, PDGFRB est faiblement exprimé dans les cellules mésangiales glomérulaires et les cellules interstitielles, mais son expression est fortement augmentée dans la fibrose rénale, ce qui suggère un rôle dans la progression de la maladie fibrosante.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspondant au domaine extracellulaire (acides aminés 32 à 530), l'anticorps reconnaît probablement le récepteur natif exposé à la surface, ce qui le rend adapté à la cytométrie en flux sur cellules vivantes non perméabilisées.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre type de cellule et vos conditions de coloration ; prévoyez d'utiliser des contrôles d'isotype appropriés et un blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• L'anticorps est validé pour la souris ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée ; si vous l'utilisez dans d'autres systèmes modèles, validez-le par comparaison avec l'expression connue de PDGFRB chez la souris.
• PDGFRB est une protéine de 123 kDa ; assurez une compensation correcte lorsque vous utilisez des anticorps conjugués à la PE dans des panels de cytométrie multicolore, car la PE est un fluorophore intense.
• Privilégiez des méthodes de dissociation cellulaire enzymatique ou non enzymatique qui préservent les épitopes de surface, car la trypsinisation peut cliver le récepteur et réduire l'intensité de la coloration.

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