Anticorps polyclonal de lapin anti-MMP14/MT1-MMP pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50281

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MMP14/MT1-MMP

• La métalloprotéinase matricielle 14 (MMP14), également désignée MT1-MMP, est une métalloprotéinase de type membranaire synthétisée sous forme de zymogène qui nécessite un clivage protéolytique pour être activée. Elle contient des ponts disulfures caractéristiques, des sites de liaison au calcium et au zinc, et est régulée par phosphorylation.
• En tant qu'endopeptidase, la MMP14 dégrade divers composants de la matrice extracellulaire, plus particulièrement le collagène, et est essentielle pour la collagénolyse péricellulaire et le remodelage du tissu conjonctif (PubMed:8015608).
  Références associées :
  PMID:8015608
• La MMP14 active la pro-gélatinase A (pro-MMP2) par clivage protéolytique, agissant ainsi comme régulateur positif de la croissance et de la migration cellulaires. Elle contribue également à la formation des tissus fibrovasculaires avec la pro-MMP2 (PubMed:22065321, PubMed:12714657).
  Références associées :
  PMID:22065321
  PMID:12714657
• L'enzyme agit comme régulateur de la signalisation Notch en médiant le clivage et l'inhibition du ligand DLL1 (PubMed:21572390).
  Références associées :
  PMID:21572390
• La MMP14 clive l'ADGRB1 pour libérer la vasculostatine-40, un inhibiteur de l'angiogenèse, et clive également inactive le récepteur GDF15 GFRAL, modulant la réponse aversive GDF15-GFRAL (PubMed:22330140, PubMed:35177851).
  Références associées :
  PMID:22330140
  PMID:35177851
• Sa localisation est principalement au niveau de la membrane cellulaire, mais la MMP14 est également détectée dans les mélanosomes et le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans la protéolyse péricellulaire et la signalisation intracellulaire.
• Son expression est marquée dans les cellules stromales du côlon, du sein, de la tête et du cou, ainsi que dans les tumeurs pulmonaires, ce qui correspond à sa fonction dans le remodelage du microenvironnement tumoral.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 75–174 du domaine extracellulaire de la MMP14 humaine, une région conservée chez l'homme, la souris et le rat – ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée.
• Pour le western blotting, la pro-enzyme migre autour de 66 kDa ; les formes actives traitées peuvent apparaître à des poids moléculaires inférieurs. Validez les profils de bandes en utilisant des lysats de cellules ou de tissus appropriés (par exemple, cellules de fibrosarcome HT‑1080, tissu placentaire).
• En immunohistochimie (IHC‑P), la récupération d'antigène peut être nécessaire ; testez sur des coupes incluses en paraffine d'échantillons de tumeurs du côlon, du sein ou du poumon. Une coloration stromale est attendue.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), la perméabilisation est nécessaire pour détecter la MMP14 cytoplasmique et membranaire. Utilisez des contrôles d'isotype appropriés.
• Pour les applications ELISA, il convient d'envisager un appariement avec un anticorps de capture dirigé contre un épitope distinct ; la nature polyclonale de l'anticorps peut offrir un signal robuste lorsqu'il est utilisé comme détecteur.
• Comme pour tous les anticorps polyclonaux, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée dans le système d'essai prévu.

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