Anticorps polyclonal de lapin anti-MMP12 pour WB, IF/ICC, ELISA - P39900

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la MMP12

• La métalloélastase macrophage (MMP-12, également appelée ME, HME, MMP12) est une métalloprotéinase matricielle sécrétée appartenant à la famille des endopeptidases dépendantes du zinc.
• La MMP-12 présente une activité élastolytique significative et est impliquée dans la lésion et le remodelage tissulaire ; elle présente une préférence pour la leucine au site P1' et pour des résidus aromatiques/hydrophobes au site P1.
• L'enzyme est principalement exprimée dans les macrophages alvéolaires et n'est pas détectée dans les monocytes du sang périphérique, ce qui met en évidence son rôle dans l'homéostasie tissulaire pulmonaire et l'inflammation.
• Au niveau sous-cellulaire, la MMP-12 est sécrétée dans l'espace extracellulaire et se localise dans la matrice extracellulaire, où elle dégrade l'élastine et d'autres composants matriciels.
• En tant que membre de la famille des MMP, elle contient des domaines caractéristiques dont un pro-peptide qui maintient la latence (forme zymogène), et son activité requiert des ions calcium et zinc.
• Les caractéristiques structurelles incluent des ponts disulfures et une glycosylation, comme indiqué dans les mots-clés UniProt ; une structure 3D a été déterminée.
• La protéine entière a un poids moléculaire prédit d'environ 54 kDa (calculé à 54002 Da), ce qui correspond à la bande observée en Western blotting.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène était un peptide synthétique correspondant aux résidus 200-300 de la MMP-12 humaine (NP_002417.2). Lors de la conception de vos expériences, prenez en compte que cette région se trouve dans le domaine catalytique et peut reconnaître à la fois les formes pro et active, mais ne chevauche pas le peptide signal.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 54 kDa ; cependant, la glycosylation peut entraîner de légers décalages de migration. Validez la taille de la bande observée dans votre système d'échantillon spécifique.
• En IF/ICC, la MMP-12 est sécrétée : les conditions de perméabilisation et de fixation doivent donc être optimisées pour conserver le signal associé à la matrice extracellulaire. Une co-coloration avec des marqueurs de macrophages peut aider à confirmer la spécificité sur coupes de tissus.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé d'utiliser de la MMP-12 recombinante ou des standards de protéines purifiées pour établir les courbes d'étalonnage et évaluer l'efficacité de liaison de l'anticorps.

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