Anticorps polyclonal de lapin anti-MMP1 pour WB, ELISA - P03956

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MMP1

• La MMP1 (collagénase interstitielle ou collagénase fibroblastique) est un membre de la famille des métalloprotéinases matricielles qui clive les collagènes I, II et III au niveau d'un site hélicoïdal unique, ainsi que les collagènes VII et X.
  Références associées :
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• Au cours de l'infection par le VIH, la MMP1 interagit avec et clive la protéine virale Tat sécrétée, réduisant la neurotoxicité médiée par Tat.
  Références associées :
  PMID:16807369

• Synthétisée sous forme de zymogène inactif (pro-MMP1), son activation nécessite le clivage autocatalytique du propeptide, régulé par le commutateur à cystéine et le motif de liaison au zinc.

• L'enzyme sécrétée se localise dans l'espace extracellulaire et la matrice extracellulaire, où elle médie la dégradation du collagène et le remodelage tissulaire.

• Structurellement, la MMP1 possède un peptide signal, un propeptide, un domaine catalytique avec un site de liaison au zinc et un domaine de type hémopexine ; c'est une glycoprotéine présentant des liaisons disulfure stabilisatrices.

• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et éventuellement la glycosylation, qui peuvent influencer l'activité enzymatique et les interactions extracellulaires.

• Le gène humain MMP1 code pour une protéine dont le poids moléculaire calculé est d'environ 54 kDa, agissant comme une métalloprotéase dépendante du calcium.

• La MMP1 participe au renouvellement de la matrice extracellulaire, contribuant à des processus tels que la cicatrisation des plaies, le développement embryonnaire et la destruction pathologique de la matrice.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 20-280) couvre le propeptide et les domaines catalytiques, il peut potentiellement reconnaître à la fois les formes pro et actives de la MMP1, ce qui le rend adapté à la détection totale de MMP1 en WB.
• Dans des conditions de WB réductrices, la forme pro (~54 kDa) et la forme active (~44 kDa) peuvent être séparées ; validez la taille des bandes avec des contrôles appropriés.
• Pour l'ELISA, envisagez d'associer cet anticorps à un anticorps de capture monoclonal ciblant un épitope distinct pour améliorer la spécificité ; testez la réactivité croisée dans la matrice d'échantillon concernée.
• Les surnageants de culture cellulaire ou les homogénats tissulaires sont les types d'échantillons recommandés ; pour la détection intracellulaire, un inhibiteur de sécrétion (par exemple la bréfeldine A) peut améliorer le signal.
• Incluez des contrôles positifs (par exemple des fibroblastes stimulés par PMA) et des contrôles négatifs pour confirmer l'induction de MMP1 et la spécificité de l'anticorps.

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