Anticorps polyclonal de lapin anti-MLL5/KMT2E pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q8IZD2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MLL5/KMT2E

• MLL5, également appelé lecteur d'histone KMT2E, est une histone-lysine N-méthyltransférase 2E inactive qui agit comme régulateur associé à la chromatine. Il se lie à l'histone H3 triméthylée au niveau du Lys-4 (H3K4me3) via son domaine doigt PHD, ce qui médie l'interaction avec la chromatine en aval des sites de départ de transcription des gènes actifs. Références associées : PMID:23798402 PMID:24130829

• Il joue un rôle clé dans l'hématopoïèse, régulant la différenciation myéloïde terminale et l'auto-renouvellement des cellules souches hématopoïétiques par un mécanisme impliquant la méthylation de l'ADN (Par similarité).

• MLL5 participe à la régulation du cycle cellulaire à plusieurs stades, notamment la transition G1/S, la progression en phase S et l'entrée en mitose. Il est recruté sur les promoteurs sensibles à E2F1 par HCFC1, où il stimule H3K4me3 et l'activation transcriptionnelle, facilitant la transition G1 vers S. Références associées : PMID:14718661 PMID:18573682 PMID:19264965 PMID:23629655

• L'isoforme NKp44L fonctionne comme ligand cellulaire pour le récepteur de cytotoxicité naturelle NCR2/NKp44, agissant potentiellement comme signal de danger dans l'immunité innée médiée par les cellules NK.

• Au niveau subcellulaire, MLL5 se localise dans le noyau (nucléoplasme et speckles nucléaires), mais peut également être trouvé dans le cytoplasme, le centrosome et la membrane cellulaire selon l'isoforme et le contexte cellulaire.

• La protéine est largement exprimée dans les tissus adultes et fœtaux, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus et le rein fœtaux, ainsi que dans les tissus hématopoïétiques adultes, le jéjunum et le cervelet. L'isoforme NKp44L n'est pas détectée sur les cellules circulantes saines mais est exprimée sur de nombreuses lignées cellulaires tumorales et transformées. Références associées : PMID:12101424 PMID:23958951

• Structurellement, MLL5 possède un domaine SET (méthyltransférase inactive), un doigt PHD et des régions en superenroulement, et est soumis à des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 200 à 500, une région contenant le domaine doigt PHD. Cet anticorps peut être particulièrement adapté pour détecter la MLL5 liée à la chromatine dans des applications liées à la ChIP si il est adapté.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 205 kDa ; pensez à utiliser un gel à faible pourcentage et des durées de transfert prolongées. Validez la spécificité avec des contrôles appropriés, car plusieurs isoformes existent.
• En immunofluorescence et en immunohistochimie, MLL5 peut présenter des profils de coloration en speckles nucléaires ou centrosomaux selon le type cellulaire et la fixation. Incluez des étapes de perméabilisation et une co-coloration avec des marqueurs d'organites.
• Pour l'ELISA, utilisez l'immunogène protéique recombinant comme antigène de revêtement positif pour établir les conditions de test. La réactivité croisée avec la MLL5 de souris et de rat peut permettre des tests multi-espèces.

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