Anticorps monoclonal anti-MLKL pour WB, IHC-P, ELISA - Q8NB16

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de MLKL

• MLKL (protéine pseudo-kinase de type domaine kinase à lignées mixtes) est une pseudo-kinase qui joue un rôle essentiel dans la nécroptose induite par le facteur de nécrose tumorale (TNF), une voie de mort cellulaire programmée distincte de l’apoptose. Références associées : PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Elle ne possède pas d’activité intrinsèque de protéine kinase et agit en aval de RIPK3. Après phosphorylation par RIPK3, MLKL forme des homotrimères et se transloque vers la membrane plasmique, provoquant un influx de calcium et des dommages membranaires afin d’exécuter la mort cellulaire nécroptotique. Références associées : PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• MLKL intervient également dans la nécroptose nucléaire déclenchée par les infections virales. Après activation par ZBP1, RIPK3 nucléaire phosphoryle MLKL, ce qui entraîne une perturbation de l’enveloppe nucléaire et la fuite de l’ADN cellulaire dans le cytosol.
• La protéine se lie à des inositol-phosphates fortement phosphorylés, tels que l’inositol hexakisphosphate (InsP6), ce qui est essentiel à sa fonction nécroptotique. Références associées : PMID:29883610
• MLKL se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire et le noyau, ce qui concorde avec son rôle dynamique dans la signalisation et l’exécution de la mort cellulaire.
• L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes de MLKL, contribuant potentiellement à la diversité de sa régulation.
• Les mots-clés associés à MLKL comprennent liaison à l’ATP, hélice superenroulée, nécrose, phosphoprotéine et liaison aux nucléotides, reflétant ses domaines structuraux et son rôle dans la signalisation de la nécroptose.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps a été produit contre un peptide synthétique issu du MLKL humain ; il peut reconnaître les formes dénaturées et natives, ce qui permet des applications telles que le Western blot (WB) et l’ELISA.
• En Western blot, une bande d’environ 54 kDa est attendue pour le MLKL humain et murin ; inclure des contrôles positifs appropriés afin de confirmer la spécificité.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération antigénique peuvent nécessiter une optimisation, et une validation à l’aide de coupes de tissus positifs connus est recommandée.
• La réactivité croisée de l’anticorps avec le MLKL murin permet son utilisation dans des modèles murins de nécroptose ; toutefois, ses performances doivent être validées dans le système expérimental concerné.
• MLKL étant une phosphoprotéine, il convient de prendre en compte le rôle de la phosphorylation dans votre contexte expérimental, car les modifications induites par l’activation peuvent affecter la détection.
• Pour les essais de nécroptose, l’induction de l’activation de MLKL nécessite généralement des traitements combinés (par exemple, TNF-α, un mimétique de Smac et un inhibiteur des caspases) ; confirmer l’état d’activation à l’aide de contrôles appropriés.

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