Anticorps monoclonal anti-MLH1 (validé KO) pour WB, ELISA - P40692

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine Mlh1 de réparation des erreurs d'appariement de l'ADN

• MLH1 code pour la protéine Mlh1 de réparation des erreurs d'appariement de l'ADN (homologue 1 de la protéine MutL), un composant clé du système de réparation post-réplicative des erreurs d'appariement de l'ADN (MMR). Il est également connu sous différents alias, notamment FCC2, COCA2 et HNPCC.
• MLH1 forme un hétérodimère avec PMS2 pour constituer le MutL alpha. Après la reconnaissance des erreurs d'appariement par le MutS alpha (MSH2-MSH6) ou le MutS beta (MSH2-MSH3), le MutL alpha est recruté au niveau de l'hétéroduplex. En présence de RFC et PCNA, il active l'activité endonucléase de PMS2, introduisant des cassures simple brin près de l'erreur d'appariement pour faciliter la dégradation spécifique du brin par EXO1.
• MLH1 forme également un hétérodimère avec MLH3 (MutL gamma) qui est impliqué dans la recombinaison méiotique.
• La protéine se localise dans le noyau et s'associe aux chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la réparation de l'ADN et le maintien de l'intégrité génomique.
• Son expression tissulaire est large, avec des niveaux plus élevés détectés dans le côlon, les lymphocytes, le sein, le poumon, la rate, le testicule, la prostate, la thyroïde, la vésicule biliaire et le cœur.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination. MLH1 participe à la signalisation des dommages à l'ADN, qui peut induire un arrêt du cycle cellulaire ou l'apoptose après des dommages ADN sévères. Il est classé comme suppresseur de tumeur, et les mutations de MLH1 sont associées au cancer colorectal héréditaire sans polypose (HNPCC).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est la protéine MLH1 recombinante humaine, ce qui peut permettre d'obtenir des anticorps reconnaissant les formes natives et dénaturées. En Western blot, une bande spécifique d'environ 85 kDa est attendue dans les lysats de cellules ou de tissus humains. Il est recommandé d'inclure un échantillon contrôle validé knock-out (KO) pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection de l'antigène ; envisagez un appariement avec un autre clone ciblant un épitope distinct pour le développement d'un ELISA sandwich. Utilisez la protéine MLH1 recombinante comme étalon pour la quantification.
• Compte tenu de la localisation nucléaire de MLH1, des protocoles d'extraction nucléaire adaptés peuvent améliorer la sensibilité de détection en WB lors de l'utilisation de lysats de cellules entières.

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