Anticorps monoclonal anti-MIPEP pour WB, IF/ICC, ELISA - Q99797

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la peptidase intermédiaire mitochondriale (MIPEP)

• La MIPEP, également connue sous les noms de MIP, HMIP et COXPD31, est une peptidase intermédiaire mitochondriale qui transforme les protéines précurseurs mitochondriales codées par le génome nucléaire après leur importation.
• Elle se localise spécifiquement dans la matrice mitochondriale, où elle clive les octapeptides N-terminaux des formes intermédiaires des protéines afin de générer leur taille mature et fonctionnelle.
• La MIPEP est une métalloprotéase dépendante du zinc qui nécessite des cations divalents tels que Zn²⁺, Mn²⁺ ou Mg²⁺ pour son activité catalytique.
• Cette protéine appartient à la famille M3 des métalloendopeptidases et est hautement conservée entre les espèces, ce qui reflète son rôle essentiel dans la protéostasie mitochondriale.
• Les mutations du gène MIPEP provoquent le déficit combiné de la phosphorylation oxydative 31 (COXPD31), une maladie mitochondriale sévère avec atteinte multisystémique.
• Des modifications post-traductionnelles telles que l’acétylation peuvent réguler l’activité ou la stabilité de la MIPEP au sein de la matrice mitochondriale.
• En tant qu’enzyme clé de la maturation des protéines mitochondriales, la MIPEP influence l’assemblage de la chaîne respiratoire, la production d’ATP et le métabolisme énergétique cellulaire global.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 511–713 de la MIPEP humaine ; l’anticorps peut reconnaître la protéine pleine longueur (~81 kDa). Vérifiez la spécificité à l’aide de lysats enrichis en mitochondries provenant de lignées cellulaires humaines (p. ex. HeLa, HEK293) et envisagez des contrôles par extinction génique à l’aide de siRNA.
• Pour le Western blot, optimisez les tampons d’extraction afin de préserver les protéines mitochondriales et utilisez des échantillons frais ou correctement conservés pour éviter leur dégradation.
• En IF/ICC, associez-le à un marqueur mitochondrial tel que Tom20 pour une localisation sans ambiguïté. Les étapes de perméabilisation doivent être optimisées pour les antigènes de la membrane mitochondriale.
• Les applications en ELISA peuvent être envisageables pour la MIPEP native ou recombinante, mais une optimisation empirique des conditions de revêtement et de détection est recommandée.
• En tant qu’anticorps monoclonal de lapin, il offre une reproductibilité constante entre les lots et une haute affinité, ce qui le rend adapté aux essais quantitatifs exigeants.

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