Anticorps polyclonal anti-MGAT3 pour WB et ELISA - Q09327

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du MGAT3

• MGAT3 code pour la bêta-1,4-mannosyl-glycoprotéine 4-bêta-N-acétylglucosaminyltransférase (également connue sous le nom de GNT-III ou N-acétylglucosaminyltransférase III), une glycosyltransférase clé qui ajoute une N-acétylglucosamine (GlcNAc) bissectrice au mannose lié en bêta du cœur trimannosylique des N-glycanes, modifiant ainsi la structure et la fonction des oligosaccharides des glycoprotéines.
• L'ajout de ce résidu GlcNAc bissecteur supprime le traitement et l'élongation ultérieurs des N-glycanes, empêchant la formation de la ramification bêta-1,6 GlcNAc catalysée par le MGAT5, car MGAT5 ne peut pas utiliser l'oligosaccharide bissecté comme substrat (PubMed:19403558). Références associées : PMID:19403558
• Les modifications du GlcNAc bissecteur catalysées par MGAT3 influencent l'adhésion et la migration cellulaires : l'ajout à CDH1/E-cadhérine module sa localisation à la membrane cellulaire (PubMed:19403558), et l'inhibition de la formation de NeuAc-alpha-2,3-Gal-bêta-1,4-GlcNAc- par MGAT3 régule la sialylation et la migration cellulaire (PubMed:26801611). Références associées : PMID:19403558 PMID:26801611
• Dans le cerveau, MGAT3 ajoute un GlcNAc bissecteur à la BACE1, bloquant son adressage lysosomal sous stress oxydatif et augmentant sa localisation dans les endosomes précoces, ce qui améliore le clivage de l'APP et la génération de bêta-amyloïde.
• MGAT3 modifie les N-glycanes du Fc des IgG en ajoutant un GlcNAc bissecteur aux N-glycanes de type complexe, affectant la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) et potentiellement les fonctions des anticorps thérapeutiques.
• L'enzyme est localisée à la membrane de l'appareil de Golgi, spécifiquement la membrane du stack de Golgi, ce qui est cohérent avec son rôle dans le traitement tardif des N-glycanes.
• Les noms alternatifs incluent GNT3, GNT-III et N-acétylglucosaminyltransférase III ; la protéine est prédite contenir un hélice transmembranaire et une ancre signal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 364–533, une région accessible pour la génération d'anticorps ; envisagez d'utiliser cet anticorps en Western blot dans des conditions réductrices, où une bande majeure autour de 61 kDa peut être observée.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de coating et validez dans la matrice d'échantillon prévue, car les profils de glycosylation et l'abondance de la cible peuvent varier entre les tissus ou les lignées cellulaires.
• Étant donné la réactivité croisée signalée avec la souris et le rat, validez la spécificité de la cible dans ces espèces par alignement de séquences ou contrôles supplémentaires, surtout si utilisé dans des échantillons non humains.
• Puisque MGAT3 est une protéine résidente du Golgi, envisagez des protocoles appropriés de lyse d'échantillon et de fractionnement pour enrichir les compartiments membranaires pour une détection plus robuste.

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