Anticorps monoclonal anti-MFG-E8 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q08431

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MFG-E8

• La lactadhérine (MFG-E8) est une glycoprotéine de 43 kDa codée par le gène MFGE8 ; l'épissage alternatif peut produire de multiples isoformes, mais la forme principale contient systématiquement des domaines de type EGF-like et discoidin-like F5/8 type C.
• Elle favorise l'homéostasie de l'épithélium intestinal et la cicatrisation muqueuse, tout en soutenant la néovascularisation dépendante du VEGF (angiogenèse).
• MFG-E8 fonctionne comme une molécule de pontage clé pour la clairance phagocytaire des cellules apoptotiques : elle se lie à la phosphatidylsérine sur les cellules mourantes et engage les intégrines αvβ3 et αvβ5 sur les phagocytes.
• La protéine peut s'attacher directement aux membranes enrichies en phosphatidylsérine de manière indépendante d'un récepteur et interagit avec la zone pellucide, suggérant un rôle dans la liaison spermatozoïde-ovule.
• C'est un constituant principal de l'amyloïde de la média aortique, la liant à des dépôts vasculaires pathologiques.
• Au niveau subcellulaire, MFG-E8 se trouve sur la membrane cellulaire, sécrétée dans l'espace extracellulaire, et à l'intérieur des vésicules cytoplasmiques/sécrétrices ainsi que sur la membrane de l'acrosome.
• La spécificité tissulaire comprend les cellules épithéliales mammaires, la média aortique, et une surexpression dans plusieurs carcinomes ; elle est également présente dans les globules gras du lait.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des ponts disulfure, une glycosylation et une phosphorylation ; la protéine est classée sous des mots-clés tels qu'amyloïde, angiogenèse, adhésion cellulaire, fécondation et protéome de référence sécrété.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre le domaine C-terminal (acides aminés 231–387) du MFG-E8 humain, ce qui devrait générer des anticorps reconnaissant la protéine pleine longueur d'environ 43 kDa en western blot ; envisagez de charger 20–30 µg de lysat réduit.
• En raison de la réactivité croisée avec la souris et le rat, l'anticorps est adapté aux études multi-espèces ; validez toujours les niveaux d'expression dans le système d'échantillon choisi.
• Pour l'IF/ICC, une perméabilisation est recommandée car MFG-E8 se localise sur les membranes et les vésicules ; optimisez la fixation et la dilution de l'anticorps pour minimiser le bruit de fond.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réagent de capture ou de détection ; le coupler avec un deuxième anticorps reconnaissant un épitope distinct peut améliorer la sensibilité.

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