Anticorps polyclonal de lapin anti-METTL8 pour WB, ELISA - Q9H825

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de METTL8

• METTL8 (protéine 8 de type méthyltransférase) est également connue sous le nom de ARNt N(3)-cytidine méthyltransférase mitochondriale METTL8, et ARNm N(3)-méthylcytidine méthyltransférase METTL8. Elle appartient à la superfamille des méthyltransférases et utilise la S-adénosyl-L-méthionine (SAM) comme donneur de méthyle.
• En tant qu'enzyme mitochondriale, METTL8 catalyse spécifiquement la modification N(3)-méthylcytidine (m3C) à la position 32 de la boucle anticodon de l'ARNt mitochondrial(Ser)(UCN) et de l'ARNt(Thr). Cette modification est cruciale pour l'efficacité de la traduction mitochondriale et le bon fonctionnement de la chaîne respiratoire. Références associées : PMID:34774131, PMID:35017528
• L'activité de méthylation de METTL8 sur l'ARNt mitochondrial(Ser)(UCN) nécessite une modification préalable par la N(6)-diméthylallyladénosine(37) (i6A37) par l'enzyme TRIT1, ce qui indique une voie de modification hiérarchique. Références associées : PMID:34774131, PMID:35017528
• Il a été rapporté que METTL8 médie la modification m3C sur certains ARNm, mais la prévalence et la signification biologique de cette activité in vivo restent incertaines et nécessitent une validation supplémentaire. Références associées : PMID:28655767, PMID:33313824
• Au niveau subcellulaire, METTL8 se localise principalement dans les mitochondries, conformément à son rôle dans la modification de l'ARNt mitochondrial. La protéine possède un peptide de transit pour l'importation mitochondriale.
• Le gène METTL8 subit un épissage alternatif, pouvant produire plusieurs isoformes. UniProt répertorie l'isoforme révisée avec un poids moléculaire d'environ 33,4 kDa.
• Les caractéristiques clés de la protéine incluent la formation de liaisons isopeptidiques, la conjugaison Ubl et la classification sous les mots-clés de traitement de l'ARNt et mitochondriaux.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps est une protéine recombinante couvrant la région N-terminale (acides aminés 1-140) de la METTL8 humaine. Cette région peut inclure des parties du peptide de transit et du domaine catalytique précoce.
• Pour les applications de Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats enrichis en mitochondries ou des extraits de cellules entières provenant d'échantillons humains, de souris ou de rats. Le poids moléculaire prévu est d'environ 33 kDa, mais des modifications post-traductionnelles ou des variations d'isoformes peuvent déplacer la bande.
• En ELISA, cet anticorps polyclonal peut détecter la METTL8 native et dénaturée. Validez la spécificité du signal en utilisant des contrôles appropriés, tels que des lignées cellulaires avec METTL8 inactivée (knockdown ou knockout).
• La réactivité croisée avec la METTL8 de souris et de rat a été indiquée ; cependant, l'homologie de séquence doit être vérifiée et les conditions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement dans votre système expérimental.
• Pour les études fonctionnelles liant METTL8 à la traduction mitochondriale ou à l'activité de la chaîne respiratoire, envisagez d'utiliser cet anticorps conjointement avec des tests d'isolement et d'activité mitochondriale.

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