Anticorps polyclonal de lapin anti-METTL3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86U44

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de METTL3

• Identité de la protéine : La sous-unité catalytique N(6)-adénosine-méthyltransférase METTL3, également désignée protéine de type méthyltransférase 3 (hMETTL3) ou MT-A70, est le composant catalytique du complexe de méthyltransférase ARN N6 METTL3-METTL14.

• Fonction principale de N6-méthyltransférase : L'hétérodimère METTL3-METTL14 catalyse la formation de N6-méthyladénosine (m6A) sur l'ARN, préférentiellement sur les motifs consensus 5'-[AG]GAC-3'. La modification m6A régule la stabilité, le traitement, l'efficacité de la traduction et l'édition de l'ARNm, influençant divers processus biologiques. Références connexes : PMID:22575960 | PMID:24284625 | PMID:25719671 | PMID:27281194 | PMID:27373337 | PMID:27627798

• Rôles biologiques : La méthylation m6A médiée par METTL3 est impliquée dans la régulation de l'horloge circadienne, la différenciation des cellules souches embryonnaires et hématopoïétiques, la neurogenèse corticale, l'homéostasie des cellules T, la spermatogenèse, l'ovogenèse et la réponse aux dommages à l'ADN.

• Localisation subcellulaire : Principalement nucléaire avec un enrichissement dans les domaines d'épissage (speckles) nucléaires ; également détectée dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec ses fonctions de modification de l'ARN nucléaire et de promotion de la traduction cytoplasmique.

• Spécificité tissulaire : Exprimée de façon ubiquitaire à de faibles niveaux ; particulièrement détectée dans la rate, le thymus, la prostate, les testicules, les ovaires, l'intestin grêle, le côlon et les leucocytes du sang périphérique.

• Modifications post-traductionnelles et mots-clés : Acétylée, phosphorylée et sujette à la conjugation à l'ubiquitine. Possède des domaines de liaison à l'ARN et de liaison à la S-adénosyl-L-méthionine, avec un poids moléculaire de 64 474 Da.

• Pertinence dans le cancer : Une surexpression est observée dans plusieurs types de cancers, favorisant la prolifération cellulaire en partie par une amélioration de la traduction de l'ARNm indépendante de l'activité méthyltransférase. Références connexes : PMID:27117702

• Sous-strats additionnels : Méthyle les ARNmi primaires (pri-miARN) pour faciliter leur reconnaissance et leur traitement par DGCR8, et modifie l'ARN du SARS-CoV-2 pour atténuer la détection immunitaire innée dépendante de RIG-I. Références connexes : PMID:25799998 | PMID:33961823

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'immunogène correspond aux acides aminés 1-156 de la région N-terminale du METTL3 humain, qui est bien conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui soutient les allégations de réactivité croisée.
• Western blot (WB) : Utilisez des lysats cellulaires totaux ou nucléaires ; une bande proche de 64 kDa est attendue. Validez les performances de l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique, car les modifications post-traductionnelles ou les variantes d'isoformes peuvent influencer la mobilité.
• Immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC) : Une récupération d'antigène peut être nécessaire pour les sections de paraffine. La coloration nucléaire et des speckles nucléaires doit prédominer ; des signaux cytoplasmiques peuvent également être observés en fonction du type cellulaire et des conditions de fixation.
• ELISA : L'anticorps peut être utilisé comme réactif de détection contre le METTL3 recombinant ou des antigènes peptidiques ; le couplage avec un anticorps de capture METTL3 peut être exploré pour le développement d'ELISA sandwich.
• Réactivité croisée : Signalé comme reconnaissant le METTL3 humain, souris et rat ; une vérification avec des témoins positifs et négatifs appropriés est conseillée pour chaque espèce.

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