Anticorps monoclonal de lapin anti-METTL3 [KD validé] pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - Q86U44

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de METTL3

• METTL3 (sous-unité catalytique de la N(6)-adénosine-méthyltransférase) est une protéine de 64 kDa qui se localise dans les speckles nucléaires et le cytoplasme. Elle forme avec METTL14 un complexe hétérodimérique constituant le cœur catalytique responsable du dépôt de modifications m6A sur l’ARN.
  Références associées :
  PMID:27281194
  PMID:27373337
  PMID:27627798
• METTL3 dépose la modification m6A sur la séquence consensus 5′-[AG]GAC-3′ de l’ARNm, régulant ainsi la stabilité, le traitement, l’efficacité de la traduction et l’édition des transcrits.
  Références associées :
  PMID:22575960
  PMID:24284625
  PMID:25719671
• La marque m6A favorise la déstabilisation et la dégradation des ARNm une fois qu’ils sont libérés dans le nucléoplasme, permettant un contrôle dynamique de l’expression génique.
  Références associées :
  PMID:28637692
• Dans les cellules souches embryonnaires, la méthylation m6A des transcrits associés à la pluripotence par METTL3 accélère leur dégradation, facilitant ainsi la sortie de l’état naïf et la différenciation.
• METTL3 contribue à la régulation de l’horloge circadienne en accélérant le traitement nucléaire des ARNm des gènes de l’horloge et en modulant le métabolisme lipidique hépatique.
  Références associées :
  PMID:30428350
• Lors de dommages à l’ADN induits par les UV, METTL3 est rapidement recrutée sur les sites endommagés, où elle catalyse la modification m6A des transcrits poly(A), favorisant le recrutement de l’ADN polymérase κ (POLK).
  Références associées :
  PMID:28297716
• Dans le cytoplasme, METTL3 interagit avec les facteurs d’initiation de la traduction afin d’améliorer la traduction des ARNm indépendamment de son activité de méthyltransférase ; cette fonction est associée à la prolifération des cellules cancéreuses.
  Références associées :
  PMID:27117702
• Lors d’une infection par le SARS-CoV-2, METTL3 ajoute des modifications m6A à l’ARN viral, réduisant la liaison de RIG-I et atténuant ainsi la détection immunitaire innée.
  Références associées :
  PMID:33961823

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–156) de METTL3 humain. Lors de l’utilisation de cet anticorps, il convient de considérer qu’il peut reconnaître des épitopes situés dans ce fragment ; validez la liaison à METTL3 pleine longueur ainsi qu’aux éventuelles isoformes présentes dans votre système d’échantillonnage.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 64 kDa. Optimisez le pourcentage de gel (par exemple, 10 % SDS-PAGE) et les conditions de transfert pour les protéines de taille moyenne. Utilisez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• La compatibilité indiquée de l’anticorps avec la ChIP suggère qu’il peut immunoprécipiter des complexes METTL3–ARN ou METTL3–chromatine ; ajustez la réticulation, la sonication et la stringence des lavages en fonction de votre protocole spécifique.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées afin de préserver l’épitope tout en permettant l’accès de l’anticorps.
• Plusieurs applications sont indiquées ; toutefois, chaque laboratoire doit établir et optimiser les performances de l’anticorps dans ses propres conditions expérimentales.

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