Anticorps monoclonal de lapin anti-mésothéline pour WB, IF-P, ELISA - Q13421

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la mésothéline

• La mésothéline, codée par le gène MSLN, est également connue sous le nom d'antigène CAK1 et de facteur pré-pro-potentialisant les mégacaryocytes, et subit un épissage alternatif pour produire différents isoformes.
• La forme ancrée à la membrane de la mésothéline peut jouer un rôle dans l'adhésion cellulaire, contribuant aux interactions cellule-cellule.
• Le domaine du facteur potentialisant les mégacaryocytes (MPF), libéré après clivage, peut potentialiser la formation de colonies de mégacaryocytes in vitro.
• La mésothéline est localisée à la membrane cellulaire, ancrée via une ancre GPI, et est également détectée dans l'appareil de Golgi ; elle peut être sécrétée après clivage protéolytique.
• Elle est exprimée dans le tissu pulmonaire normal et à de faibles niveaux dans le cœur, le placenta et le rein ; dans les cellules mésothéliales, et est fortement exprimée au niveau protéique dans les mésothéliomes, les cancers de l'ovaire et certains carcinomes épidermoïdes.
• La protéine subit plusieurs modifications, notamment un clivage sur une paire de résidus basiques, une N-glycosylation, la formation de ponts disulfure et une phosphorylation.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent un peptide signal, une ancre GPI et la présence de multiples domaines identifiés par des études de structure 3D.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique englobant les acides aminés 500 à 600 de la mésothéline humaine ; cette région est située dans la partie C-terminale de la protéine. Lors de l'utilisation de cet anticorps, considérez qu'il peut détecter à la fois le précurseur de pleine longueur et la mésothéline mature ou le fragment MPF, selon le traitement de l'échantillon.
• Pour le Western blot (WB), anticipez une bande autour de 69 kDa (cohérente avec les 68 kDa prédits par UniProt) dans des conditions réductrices. Validez le poids moléculaire observé dans vos lysats cellulaires ou tissulaires spécifiques.
• En immunofluorescence sur coupes incluses en paraffine (IF-P), optimisez la récupération antigénique et la perméabilisation pour détecter efficacement la mésothéline associée à la membrane ou localisée dans l'appareil de Golgi.
• Pour les applications ELISA, évaluez les performances de l'anticorps en tant que réactif de capture ou de détection après des tests d'appariement empiriques, et validez-le contre la mésothéline recombinante ou les cibles naturelles dans des matrices appropriées.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain et le rat ; lorsque vous travaillez avec des échantillons de rat, confirmez la spécificité et la sensibilité dans vos conditions expérimentales, car la conservation de l'épitope peut varier.

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