Anticorps polyclonal de lapin anti-Spike RBD du MERS-CoV pour WB, IF/ICC, ELISA - K9N5Q8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike du MERS-CoV

• La glycoprotéine Spike (S) médie l'entrée virale en se liant au récepteur cellulaire DPP4 (dipeptidyl peptidase 4) et en facilitant la fusion membranaire (UniProt K9N5Q8).
• C'est une protéine de fusion virale de classe I ; lors de la fusion, ses régions en coiled-coil forment une structure en trépied qui entraîne l'accolement et la fusion des membranes.
• La protéine est clivée protéolytiquement en sous-unités S1 et S2 ; le domaine de liaison au récepteur (RBD) se situe dans S1, tandis que le peptide de fusion dans S2 est exposé après clivage endosomal.
• Codée par le gène S, c'est un facteur de virulence majeur et la cible principale des anticorps neutralisants (Mots-clés UniProt : Virulence, Protéine d'enveloppe virale).
• Au niveau subcellulaire, elle se localise à la membrane du virion, à la membrane du compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi de l'hôte, et à la membrane cellulaire de l'hôte (LOCALISATION SUBCELLULAIRE UniProt).
• Les modifications post-traductionnelles incluent la N-glycosylation, la formation de ponts disulfure et la palmitoylation, qui sont cruciales pour le repliement et la fonction de la protéine.
• La protéine Spike de pleine longueur a un poids moléculaire prédit d'environ 149 kDa (Poids moléculaire UniProt : 149 411 Da).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 18-725 du RBD) couvre le domaine de liaison au récepteur critique pour l'interaction avec le DPP4 de l'hôte ; cet anticorps peut être adapté pour les applications étudiant la liaison RBD–récepteur.
• Pour le Western blot, une bande autour de 149 kDa est attendue ; la glycosylation peut provoquer de légers décalages de migration. Envisagez d'utiliser des contrôles de déglycosylation en cas de bandes ambiguës.
• Les expériences d'immunofluorescence doivent tenir compte de la localisation de la protéine aux membranes intracellulaires et à la surface cellulaire ; les protocoles de perméabilisation nécessitent une optimisation pour la détection intracellulaire.
• Dans les configurations ELISA, le RBD de la protéine Spike recombinante (ex. : YP_009047204.1) peut servir de contrôle positif pour le titrage des anticorps et les tests de spécificité de liaison.

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