Anticorps monoclonal anti-MEK1/MEK2 pour WB, IHC-P, ELISA - Q02750 / P36507

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) et MEK2 (MAP2K2) sont des protéines kinases à double spécificité qui constituent des composants essentiels de la cascade de signalisation MAPK/ERK, transmettant les signaux de RAS activé à ERK.
• Elles catalysent la phosphorylation des résidus thréonine et tyrosine du motif Thr-Glu-Tyr de MAPK3/ERK1 et MAPK1/ERK2, entraînant leur activation et la propagation de signaux en aval impliqués dans la croissance, l’adhésion, la survie et la différenciation cellulaires.
• MEK1 active BRAF selon un mécanisme dépendant de KSR1 ou de KSR2, levant les interactions intramoléculaires inhibitrices afin de favoriser la dimérisation et l’activation de BRAF. Références associées : PMID:29433126
• Au niveau subcellulaire, MEK1 se trouve dans le cytoplasme, notamment au niveau des centrosomes et des pôles du fuseau, et peut être transférée vers le noyau et la membrane, ce qui reflète son rôle dynamique dans la transduction des signaux.
• MEK1 est largement exprimée dans les différents tissus, avec des niveaux particulièrement faibles dans le cerveau.
• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l’acétylation, et possède des domaines kinases qui lient l’ATP et les substrats nucléotidiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 170–270 de MEK1 et MEK2 humaines, une région probablement située dans le domaine kinase ; il est recommandé de vérifier la spécificité de l’épitope par compétition avec un peptide ou par mutagenèse.
• Pour le Western blot, utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat ; une bande spécifique proche de 44 kDa est attendue. Optimiser le blocage et la dilution de l’anticorps pour obtenir une détection avec un faible bruit de fond.
• Pour l’IHC-P, une récupération antigénique (par exemple avec un tampon citrate, pH 6,0) ainsi que le titrage de l’anticorps primaire sur des tissus témoins positifs connus (par exemple un carcinome du côlon) sont recommandés.
• Pour l’ELISA, l’anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; valider sa compatibilité avec des standards antigéniques appropriés ainsi que sa réactivité croisée avec les paralogues de MEK1/MEK2.
• Confirmer la spécificité de la cible à l’aide de modèles d’invalidation ou d’extinction de MEK1/MEK2 chez l’espèce concernée.

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