Anticorps Monoclonal Anti-MEK1/MEK2 pour WB, ELISA - Q02750/P36507

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) et MEK2 (MAP2K2) sont des kinases à double spécificité étroitement apparentées qui servent de composants essentiels de la voie de transduction du signal des protéines kinases activées par des mitogènes (MAP).
• Dans la cascade MAPK/ERK, MEK1/2 sont activées par les kinases RAF et phosphorylent ensuite ERK1/2 sur les résidus thréonine et tyrosine au sein d'un motif Thr-Glu-Tyr, conduisant à l'activation d'ERK.
• Il a été démontré que MEK1 active BRAF de manière dépendante de KSR1 ou KSR2, libérant les interactions intramoléculaires inhibitrices et favorisant la dimérisation de BRAF. Références connexes : PMID:29433126
• La voie médie diverses fonctions biologiques telles que la croissance cellulaire, l'adhésion, la survie et la différenciation, principalement par la régulation de la transcription, du métabolisme et du remodelage du cytosquelette.
• MEK1 exporte le récepteur nucléaire PPARG hors du noyau, reliant la cascade à la signalisation des récepteurs nucléaires.
• La cascade MAPK/ERK est également impliquée dans la régulation de la dynamique endosomale, y compris le traitement des lysosomes et le recyclage des endosomes, et contribue à la fragmentation de l'appareil de Golgi pendant la mitose.
• MEK1 est largement exprimé dans les tissus humains, avec des niveaux extrêmement faibles dans le cerveau.
• Au niveau subcellulaire, MEK1 se localise dans le cytoplasme, le cytosquelette, le centrosome, le pôle du fuseau, le noyau et la membrane.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'acétylation, et l'épissage alternatif donne naissance à plusieurs isoformes.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–360) de MEK1 humain, une séquence hautement conservée chez MEK2 ; cela suggère que l'anticorps peut reconnaître les deux kinases. Validez la spécificité à l'aide de contrôles de knock-out ou de knock-down pertinents.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 44 kDa. Optimisez les quantités chargées et les dilutions d'anticorps pour votre type d'échantillon spécifique (par exemple, lysats cellulaires totaux) et incluez des contrôles positifs (par exemple, HeLa, A431) et négatifs appropriés.
• Cet anticorps est signalé comme ayant une réactivité croisée avec la souris et le rat. Confirmez la réactivité dans votre système expérimental lorsque vous travaillez avec ces espèces.
• Pour les applications ELISA, envisagez de le coupler avec un anticorps de détection approprié pour le développement d'un ELISA sandwich ; l'optimisation du titre peut être nécessaire.
• En raison du rôle critique de MEK1/2 dans la signalisation cellulaire, le traitement avec des activateurs/inhibiteurs de la voie (par exemple, facteurs de croissance, U0126) peut être utilisé pour moduler l'intensité du signal dans vos dosages.

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