Anticorps monoclonal anti-Meckeline pour WB, IHC-P, ELISA - Q5HYA8

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Meckeline

• La Meckeline, codée par le gène TMEM67, est une protéine transmembranaire également appelée protéine du syndrome de Meckel type 3 (MKS3). Les mutations de TMEM67 sont associées à un spectre de ciliopathies, dont le syndrome de Meckel, le syndrome de Joubert et la néphronophthise.
• La protéine est un composant essentiel de la structure et de la fonction ciliaires. Elle participe au complexe de type tectonique, indispensable à la ciliogenèse tissulaire et à la régulation de la composition de la membrane ciliaire.
• La Meckeline intervient dans la migration du centrosome vers la surface apicale des cellules au début de la formation du cil, contrôle la longueur et le nombre de cils via la duplication des centrosomes. Elle agit également comme régulateur clé de l'orientation des touffes de stéréocils chez les cellules sensorielles.
• Dans la voie de signalisation Wnt, la Meckeline régule négativement la cascade Wnt canonique et active la signalisation Wnt non canonique stimulée par WNT5A, fonctionnant probablement comme corécepteur de ROR2. Références associées : PMID:26035863
• La protéine est nécessaire à la morphologie de ramification des cellules épithéliales et est essentielle à la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD) de la protéine surfactant C (SFTPC).
• Au niveau sous-cellulaire, la Meckeline se localise sur la membrane cellulaire, la membrane du réticulum endoplasmique et au niveau du cil, particulièrement dans la région du corps basal, ce qui reflète son rôle dans le trafic et l'organisation ciliaires.
• Son expression est répandue dans les tissus adultes et fœtaux, avec des niveaux élevés observés dans la moelle épinière, ce qui confirme son importance pour le neurodéveloppement et les phénotypes des ciliopathies.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et les ponts disulfure structurels ; la protéine contient un domaine en bobine superenroulée et plusieurs hélices transmembranaires, comme l'indiquent les mots-clés UniProt.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une région interne (acides aminés 800–880) de la Meckeline humaine, qui est conservée entre les espèces. Pour des résultats optimaux, validez la liaison de l'anticorps sur l'espèce cible et le type d'échantillon, car les modifications post-traductionnelles ou les variants d'épissage peuvent affecter la reconnaissance.
• Pour l'analyse par Western blot, une bande d'environ 112 kDa est attendue. Utilisez des contrôles de charge appropriés et envisagez des conditions réductrices/dénaturantes pour prendre en compte les ponts disulfure.
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération d'antigène peut être nécessaire pour exposer l'épitope. Réalisez une titration de l'anticorps et incluez des contrôles tissulaires positifs et négatifs appropriés, en particulier à partir de tissus à forte expression (par exemple la moelle épinière).
• Lors de la réalisation d'ELISA, une optimisation standard des conditions de revêtement, de blocage et de détection est recommandée. L'affinité et la spécificité de l'anticorps pour la protéine recombinante doivent être vérifiées dans le tampon d'essai approprié.
• L'anticorps présentant une réactivité croisée avec la souris et le rat, il est adapté aux modèles précliniques. Confirmez la conservation de l'épitope par alignement de séquences avant de l'appliquer à des échantillons non humains.

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