Anticorps polyclonal de lapin anti-ME3 (NADP-ME) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16798

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de ME3

• ME3 (enzyme malique 3) est une enzyme malique mitochondriale dépendante du NADP qui catalyse la décarboxylation oxydative du (S)-malate en pyruvate et CO₂, avec le NADP+ comme cofacteur. Références associées : PMID:7818469
• Elle peut également catalyser la décarboxylation de l'oxaloacétate en pyruvate, bien qu'avec une efficacité moindre.
• La réaction inverse (carboxylation réductrice du pyruvate en malate) est possible, mais elle se produit avec une efficacité nettement inférieure.
• ME3 se localise dans la matrice mitochondriale, où elle participe au métabolisme central du carbone.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes, et est régulée par phosphorylation (mot-clé Phosphoprotein).
• Elle est principalement exprimée dans les organes présentant de faibles taux de division cellulaire, ce qui suggère un rôle dans les tissus à activité proliférative réduite.
• Les mots-clés comprennent 3D-structure, metal-binding, NADP, oxidoreductase et reference proteome, ce qui indique une fonction enzymatique bien caractérisée.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 505–604 situés près de l'extrémité C-terminale de la ME3 humaine ; cette région devrait être accessible dans les conformations natives et dénaturées de la protéine.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de ME3 est d'environ 67 kDa ; validez les résultats à l'aide d'un lysat témoin positif provenant de tissus humains, murins ou de rat connus pour exprimer ME3.
• En immunohistochimie (IHC-P), envisagez d'utiliser des méthodes de récupération antigénique et des tissus présentant de faibles taux de prolifération, car l'expression de ME3 est enrichie dans ces organes.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), la coloration mitochondriale peut nécessiter une perméabilisation ; la colocalisation avec des marqueurs mitochondriaux peut confirmer la spécificité.
• Lors de l'utilisation en ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; il est recommandé de réaliser des expériences préliminaires afin d'optimiser la concentration de revêtement et les conditions de blocage.

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