Anticorps polyclonal de lapin anti-MDM2 pour WB et ELISA - Q00987

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MDM2

• MDM2 est une ligase E3 ubiquitine-protéine qui médie l'ubiquitination de p53/TP53, conduisant à sa dégradation par le protéasome. Il inhibe l'arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose médiés par p53 et p73 en se liant directement à leurs domaines d'activation transcriptionnelle. Références associées : PMID:29681526
• MDM2 agit également comme une ligase E3 ubiquitine envers elle-même et ARRB1, permet l'export nucléaire de p53, favorise la dégradation indépendante de l'ubiquitine de RB1, et inhibe l'apoptose médiée par DAXX via l'ubiquitination et la dégradation.
• MDM2 ubiquitine IGF1R et SNAI1, les ciblant pour une dégradation dépendante du protéasome. Références associées : PMID:12821780 PMID:15053880 PMID:15195100
• MDM2 régule négativement la respiration mitochondriale en se liant à NDUFS1, provoquant sa rétention cytosolique, une activité réduite du complexe I, une production accrue d'ESP et un engagement vers l'apoptose. Références associées : PMID:30879903
• La protéine se localise dans le noyau (nucléoplasme et nucléole) et le cytoplasme, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la régulation transcriptionnelle et la signalisation cytoplasmique.
• MDM2 est exprimé de manière ubiquitaire, mais plusieurs isoformes associées au cancer (Mdm2-A à Mdm2-G) sont détectées dans les tumeurs et absentes dans les tissus normaux.
• Classé comme un proto-oncogène, MDM2 est une phosphoprotéine possédant un domaine de type doigt de zinc RING et participe aux interactions hôte-virus et à la voie de conjugaison de l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 200–430 du MDM2 humain, couvrant les domaines acide, doigt de zinc et doigt RING conservés chez l'humain, la souris et le rat. Pour le transfert Western, envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires cancéreuses surexprimant MDM2 (par exemple, SJSA-1) comme contrôles positifs, et validez la détection dans les tissus de souris et de rat avec des anticorps secondaires spécifiques à l'espèce appropriés.
• Une bande primaire d'environ 55 kDa est attendue en WB ; des espèces de poids moléculaire plus élevé peuvent représenter des formes modifiées post-traductionnellement (par exemple, MDM2 ubiquitinylé ou phosphorylé). L'inclusion d'inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons peut aider à préserver le poids moléculaire attendu.
• Pour l'ELISA, testez l'anticorps à la fois en format de revêtement d'antigène direct et en format sandwich. Des titrages préliminaires en damier sont recommandés pour optimiser les concentrations d'antigène de revêtement et d'anticorps de travail.

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