Anticorps polyclonal de lapin anti-MDA5 pour WB, ELISA - Q9BYX4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du MDA5

• Le MDA5 (IFIH1), également connu sous le nom de Helicard, RLR-2 ou protéine 5 associée à la différenciation des mélanomes, est un membre de la famille des récepteurs de type RIG-I (RLR) d'hélicases à ARN cytoplasmiques DExD/H-box.
• Il sert de capteur immunitaire inné des acides nucléiques viraux et joue un rôle majeur dans l'initiation des réponses antivirales, y compris l'induction des interférons de type I et des cytokines pro-inflammatoires (PubMed:28594402, PubMed:32169843, PubMed:33727702). Références connexes : PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• Le MDA5 reconnaît l'ARN double brin long (>1 kb de longueur) et l'ARNm dépourvu de 2'-O-méthylation au niveau de leur coiffe 5' comme motifs moléculaires associés aux pathogènes (PubMed:22160685). Références connexes : PMID:22160685
• Après liaison du ligand, le MDA5 s'associe à la protéine de signalisation antivirale mitochondriale MAVS, déclenchant l'activation des kinases TBK1/IKBKE et la phosphorylation d'IRF3/IRF7 pour induire la transcription des gènes de l'interféron.
• Ce récepteur détecte un large spectre de virus, y compris les picornavirus tels que l'EMCV et le rhinovirus, les flavivirus comme la dengue et le virus du Nil occidental, le réovirus, le virus de la vaccine et le coronavirus SARS-CoV-2 (PubMed:28606988, PubMed:33440148, PubMed:33514628). Références connexes : PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• Au niveau subcellulaire, le MDA5 se trouve dans le cytoplasme, le noyau et les mitochondries.
• Il est largement exprimé à de faibles niveaux, avec une abondance relativement plus élevée dans le placenta, le pancréas et la rate, et à peine détectable dans le cerveau, les testicules et les poumons.
• Le MDA5 est une phosphoprotéine et contient des domaines CARD, un domaine hélicase DExD/H-box dépendant de l'ATP et un domaine C-terminal ; il est soumis à une régulation par ubiquitination.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps englobe les acides aminés 277–490 de l'IFIH1 humain ; il peut détecter la protéine pleine longueur (~117 kDa) ainsi que d'éventuels isoformes plus courts ou produits de clivage.
• Pour le transfert Western, envisagez d'utiliser des lysats de cellules humaines stimulées par l'interféron ou infectées par un virus pour réguler à la hausse l'expression du MDA5. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés et vérifiez les tailles des bandes par rapport aux poids moléculaires prédits.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, optimisez les conditions de revêtement et de détection en utilisant l'anticorps en combinaison avec des étalons MDA5 recombinants ou natifs appropriés ; la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille des RLR doit être évaluée.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la variabilité entre les lots peut affecter les performances ; nous recommandons de titrer et de valider chaque nouveau lot dans votre système de test spécifique.

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