Anticorps monoclonal de lapin contre la Tryptase des mastocytes (TPSB2) pour WB, IHC-P, ELISA - Q15661

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Tryptase alpha/beta-1

• La tryptase alpha/beta-1 (UniProt : Q15661), également appelée tryptase I ou tryptase alpha-1, est une sérine protéase codée par le gène TPSAB1. Elle partage une homologie de séquence élevée avec TPSB2 (tryptase beta-2).
• Elle agit comme la principale protéase neutre dans les granules de sécrétion des mastocytes et est libérée lors de la dégranulation mastocytaire, jouant un rôle clé dans les réponses inflammatoires et allergiques.
• Cette protéase est impliquée dans l'immunité innée via le clivage de divers substrats. L'isoforme 2 (également appelée tryptase beta-1) présente une spécificité de substrat différente : elle clive plus efficacement les grands substrats comme la fibronectine, mais traite moins bien les petits substrats que l'isoforme 1.
  Références associées :
  PMID:18854315
• La tryptase alpha/beta-1 est sécrétée par les cellules, ce qui est cohérent avec son rôle de médiateur extracellulaire après activation des mastocytes.
• Les isoformes présentent des distributions tissulaires distinctes : les deux sont présentes dans le poumon, l'estomac, la rate, le cœur et la peau (avec une prédominance de l'isoforme 1), tandis que l'isoforme 2 est également détectée dans l'aorte, la rate et les tumeurs mammaires, en particulier dans les cellules endothéliales des régions périvasculaires et de la vascularisation tumorale, avec une expression mastocytaire minimale au niveau protéique.
• La protéine est modifiée post-traductionnellement par glycosylation et formation de ponts disulfures, et est synthétisée sous forme de zymogène avec un peptide signal clivable. Elle est soumise à un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 30 à 275 de la TPSB2 humaine (tryptase mature sans peptide signal), ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes pro et actives. Pour le WB, le poids moléculaire prédit est d'environ 31 kDa, mais la glycosylation peut augmenter la masse apparente ; envisagez d'utiliser des enzymes déglycosylantes si un décalage est observé.
• En immunohistochimie (IHC-P), un marquage robuste est attendu dans les tissus riches en mastocytes tels que la peau, le poumon et la muqueuse gastro-intestinale. Les méthodes de récupération d'antigène (par exemple, la récupération d'épitope induite par la chaleur) sont recommandées, et des contrôles d'isotype appropriés doivent être inclus.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection ; titrez l'anticorps et validez les performances avec des standards de tryptase recombinants ou des lysats de mastocytes pour garantir la spécificité.

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