Anticorps polyclonal Anti-MAP1LC3B pour WB, ELISA - Q9GZQ8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAP1LC3B

• MAP1LC3B est un modificateur de type ubiquitine qui se conjugue aux membranes autophagosomes, favorisant l'élongation de la membrane du phagophore lors de la formation de l'autophagosome. Références associées : PMID:20418806 PMID:23209295 PMID:28017329
• Joue un rôle essentiel dans la mitophagie en ancrant les autophagolysosomes à la membrane externe des mitochondries via la liaison aux céramides C-18, facilitant l'élimination des mitochondries endommagées et régulant la qualité mitochondriale. Références associées : PMID:22922758 PMID:23209295 PMID:28017329
• Impliqué dans les voies de l'autophagie sélective, notamment la réticulophagie où il interagit avec le récepteur de réticulophagie TEX264 pour remodeler les sous-domaines du réticulum endoplasmique en autophagosomes en condition de stress nutritionnel. Références associées : PMID:31006537 PMID:31006538
• Promeut la ciliogenèse primaire en éliminant OFD1 des satellites centriolaires par la voie autophagique. Références associées : PMID:24089205
• Recrute le cofacteur JMY sur les membranes du phagophore, stimulant la nucléation de l'actine pour soutenir la biogenèse des autophagosomes. Références associées : PMID:30420355
• Se localise sur les membranes des autophagosomes, les membranes mitochondriales et le cytosquelette, ce qui est cohérent avec son rôle dans le trafic membranaire et l'autophagie.
• Il est le plus abondant dans le cœur, le cerveau, le muscle squelettique et le testicule, avec une faible expression dans le foie.
• Il est traité et lipidé via une voie de conjugaison de type ubiquitine, pour s'attacher à la phosphatidyléthanolamine des autophagosomes en formation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-50) de MAP1LC3B humaine. Pour le WB, l'anticorps peut détecter les formes full-length et potentiellement les formes traitées au niveau N-terminal ; validez les profils de clivage dans des échantillons d'autophagie induite vs non induite.
• Dans des conditions réductrices, attendez une bande principale à ~14 kDa (LC3-I) et une bande migrant plus rapidement correspondant à la forme lipidée LC3-II ; utilisez des inhibiteurs de l'autophagie (ex : chloroquine) pour les distinguer.
• Pour les applications ELISA, réalisez un test avec la protéine recombinante MAP1LC3B ou le peptide comme contrôle positif ; évaluez la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille LC3 si la spécificité est critique.
• Optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions de blocage avec des lysats de tissus ou de cellules d'origine humaine ou de rat, sur la base de la réactivité croisée rapportée.
• L'inclusion de contrôles positifs et négatifs de l'autophagie (par exemple, traitement par la rapamycine, cellules knock-out pour ATG5) est recommandée pour confirmer la détection authentique de LC3-II.

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