Anticorps polyclonal anti-MAD2/MAD2L1 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13257

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MAD2/MAD2L1

• MAD2L1 code pour la protéine MAD2A du point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique (également connue sous le nom de protéine 1 de type MAD2), un régulateur critique de la fidélité de la ségrégation des chromosomes.
• MAD2L1 est un composant central du complexe du point de contrôle mitotique (MCC), qui inhibe le complexe promoteur de l'anaphase/cyclosome (APC/C) pour retarder la ségrégation des chromosomes jusqu'à ce que tous les chromosomes soient correctement attachés au fuseau mitotique. Références associées : PMID:10700282 PMID:11804586 PMID:15024386
• Le MCC, composé de CDC20, MAD2L1/MAD2, BUB1B/BUBR1 et BUB3, sert d'effecteur clé du point de contrôle de l'assemblage du fuseau. Références associées : PMID:15020684 PMID:27509861
• L'APC/C lié au MCC reste inactif, empêchant la transition métaphase-anaphase ; la levée du point de contrôle déclenche l'auto-ubiquitination de CDC20 médiée par UBCH10, conduisant à la réactivation de l'APC/C. Références associées : PMID:27509861
• MAD2L1 subit un changement conformationnel dynamique : le conformère fermé (C-MAD2) forme un complexe avec MAD1L1 au niveau des kinétochores non attachés, recrute la MAD2 ouverte (O-MAD2) et catalyse sa conversion en C-MAD2, amplifiant ainsi le signal du point de contrôle. Références associées : PMID:29162720
• Au niveau subcellulaire, MAD2L1 se localise dans le noyau, au niveau des kinétochores des centromères, des pôles du fuseau et dans le cytoplasme, reflétant ses fonctions mitotiques multiples.
• La protéine est sujette à l'acétylation et à la phosphorylation, et l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes ; ces modifications et variants peuvent moduler l'activité du point de contrôle et les interactions protéiques.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux 205 acides aminés N-terminaux de la protéine humaine MAD2L1 ; envisagez de vérifier la spécificité d'isoforme et d'espèce dans votre système de test particulier, car une réactivité croisée avec des protéines étroitement apparentées peut survenir.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de démasquage antigénique et les conditions de fixation peuvent influencer la coloration ; une optimisation est recommandée en utilisant des contrôles positifs (par exemple, tissus mitotiques) et négatifs appropriés.
• En immunofluorescence (IF/ICC), attendez-vous à un marquage des kinétochores et des pôles du fuseau pendant la mitose ; un co-marquage avec des marqueurs des centromères ou de la tubuline peut aider à confirmer l'engagement de la cible.
• Pour l'ELISA, la protéine MAD2L1 recombinante purifiée peut servir de contrôle positif ; un titrage des concentrations d'anticorps et d'antigène est conseillé pour établir des rapports signal/bruit optimaux.
• Validez toujours l'anticorps dans vos échantillons spécifiques et le contexte de votre application, car les performances peuvent varier selon les types cellulaires et les conditions expérimentales.

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