Anticorps Monoclonal Lapin Anti-LSD2/KDM1B/AOF1 pour WB, ELISA - Q8NB78

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de LSD2/KDM1B/AOF1

• LSD2/KDM1B/AOF1 est une déméthylase d'histone spécifique à la lysine qui retire spécifiquement les groupes mono- et di-méthyles de la lysine 4 de l'histone H3 (H3K4me1/2), agissant ainsi comme un corépresseur transcriptionnel.
• Il ne montre aucune activité envers la H3K4 tri-méthylée, ou la H3K9, H3K27, H3K36 ou H4K20 méthylées, démontrant une haute spécificité de substrat.
• L'enzyme est nécessaire pour la méthylation de l'ADN de novo d'un sous-ensemble de gènes imprimés au cours de l'ovogenèse, le liant à la programmation épigénétique du développement.
• La catalyse se poursuit par oxydation dépendante du FAD du substrat, formant un intermédiaire imine qui est ensuite hydrolysé.
• Seul, LSD2 a une activité minimale sur les substrats nucléosomiques ; l'association avec GLYR1 forme un complexe qui déméthyle efficacement H3K4me sur les nucléosomes, facilitant la transcription par Pol II à travers la chromatine. Références connexes :
  PMID:30970244
• Au niveau subcellulaire, la protéine se localise dans le noyau et est associée aux chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la modification de la chromatine.
• La protéine possède des domaines doigt de zinc et des motifs de liaison au FAD, la classant comme un régulateur de la chromatine et une flavoprotéine.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, et il existe plusieurs isoformes dues à l'épissage alternatif.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène cible la région N-terminale (aa 1-100) ; par conséquent, les isoformes dépourvues de cette région ou présentant des troncations N-terminales pourraient ne pas être détectées. Vérifiez dans les systèmes pertinents.
• Pour le Western blot, les extraits nucléaires sont recommandés pour enrichir cette protéine liée à la chromatine. Optimisez la dilution de l'anticorps en utilisant un témoin positif, tel que des lysats cellulaires HeLa ou HEK-293.
• Le poids moléculaire attendu est d'environ 92 kDa. Confirmez l'identité de la bande avec des marqueurs de poids moléculaire appropriés et envisagez d'utiliser des agents de blocage optimisés pour les phosphoprotéines si vous étudiez des formes phosphorylées.
• Une réactivité croisée a été observée avec des échantillons humains, de souris et de rat. Lors de l'utilisation d'échantillons d'autres espèces, effectuez des expériences de validation initiales.
• Pour les applications ELISA, titrez la concentration de l'anticorps et confirmez la spécificité en utilisant des protéines recombinantes ou des tests de blocage par peptide.

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