Anticorps Monoclonal Lapin Anti-LRRK2 pour WB, ELISA - Q5S007

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du LRRK2

• LRRK2 (protéine kinase sérine/thréonine à répétitions riches en leucine 2), également connu sous le nom de Dardarine ou PARK8, est une grande protéine multidomaine possédant à la fois des activités kinase sérine/thréonine et GTPase ; la fonction GTPase via le domaine Roc régule son activité kinase. Références connexes : PMID:18230735, PMID:26824392, PMID:28720718
• Cette kinase phosphorylate un large éventail de substrats impliqués dans des processus cellulaires critiques, notamment la plasticité neuronale, l'immunité innée, l'autophagie et le trafic vésiculaire. Références connexes : PMID:17114044, PMID:20949042, PMID:21850687
• LRRK2 est un régulateur majeur des GTPases RAB ; il phosphorylate plusieurs membres de la famille RAB (RAB3, RAB5, RAB8, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35, RAB43), contrôlant ainsi leur échange GDP/GTP et leurs interactions avec les effecteurs. Références connexes : PMID:23395371, PMID:26824392, PMID:28720718
• LRRK2 régule positivement l'autophagie via un mécanisme dépendant du calcium qui active la voie de signalisation CaMKK/AMPK, impliquant la libération de calcium lysosomal. Références connexes : PMID:22012985
• Dans les neurones, LRRK2 module la morphologie des processus, le trafic des vésicules synaptiques et la ciliogenèse primaire ; il phosphorylate RAB8A et RAB10 pour promouvoir la signalisation du hérisson sonique (SHH) dans le cerveau. Références connexes : PMID:17114044, PMID:24687852, PMID:29125462, PMID:30398148
• Les mutations du gène LRRK2 sont la cause génétique la plus fréquente de la maladie de Parkinson familiale (PARK8) et contribuent également aux cas sporadiques.
• Au niveau subcellulaire, LRRK2 se localise dans de nombreux compartiments membranaires, notamment l'appareil de Golgi, le réticulum endoplasmique, les endosomes, les lysosomes, les mitochondries et les vésicules synaptiques ; il est également présent dans le cytosol et associé au cytosquelette.
• LRRK2 est largement exprimé, avec des niveaux élevés dans le cerveau, le cœur et le foie ; dans le système nerveux central, il est prédominant dans les zones dopaminoceptives et les neurones pyramidaux corticaux.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 100 à 340 du LRRK2 humain, une région N-terminale ; envisagez l'accessibilité de l'épitope dans les conditions natives par rapport aux conditions dénaturantes lors de la conception des tests de détection.
• Pour le transfert Western (Western blot), utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés adaptés aux protéines de poids moléculaire élevé (~286 kDa).
• Dans les applications ELISA, validez la détection en utilisant la protéine LRRK2 recombinante ou des lysats de lignées cellulaires exprimant la cible de manière endogène.
• La réactivité croisée est confirmée pour l'humain ; pour d'autres espèces, évaluez l'homologie de séquence de la région de l'immunogène et effectuez une expérience pilote.

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